百歐博偉生物芽孢染色的操作方法介紹！
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2018-09-26 15:33:56
芽孢染色法
方法1
(1)加1～2滴自來水于小試管中，用接種環(huán)從斜面上挑取2～3環(huán)培養(yǎng)18～24h的枯草芽孢桿菌菌苔于試管中，并充分混勻打散，制成濃稠的菌液。
(2)加5%孔雀綠水溶液2～3滴于小試管中，用接種環(huán)攪拌使染料與菌液充分混合。
(3)將此試管浸于沸水浴(燒杯)中，加熱15～20min。
(4)用接種環(huán)從試管底部挑數(shù)環(huán)菌于潔凈的載玻片上，并涂成薄膜，將涂片通過微火3次固定。
(5)水洗，至流出的水中無孔雀綠顏色為止。
(6)加沙黃水溶液，染2～3min后，傾去染液，不用水洗，直接用吸水紙吸干。
(7)干燥后用油鏡觀察。芽孢綠色，菌體紅色。
方法2
(1)取37℃培養(yǎng)18～24h的枯草芽孢桿菌作涂片，并干燥，固定。
(2)于涂片上滴人3～5滴5%孔雀綠水溶液。
(3)用試管夾夾住載玻片在火焰上用微火加熱，自載玻片上出現(xiàn)蒸汽時，開始計算時間約4～5min。加熱過程中切勿使染料蒸干，必要時可添加少許染料。
(4)傾去染液，待玻片冷卻后，用自來水沖洗至孔雀綠不再褪色為止。
(5)用0.5%沙黃水溶液(或0.05%堿性復(fù)紅)復(fù)染lmin，水洗。
(6)制片干燥后用油鏡觀察。芽孢呈綠色，菌體紅色。
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