目前食用菌二、三級(jí)菌種的制作和金針菇、猴頭菇等熟料栽培一般采用固體培養(yǎng)基,接種前都需要高壓滅菌,而滅菌徹底與否是二、三級(jí)菌種制作和熟料栽培成功的關(guān)鍵,它還直接影響到菌種場(chǎng)的信譽(yù)和經(jīng)濟(jì)效益、食用菌栽培者的收入及食用菌栽培實(shí)踐教學(xué)的順利進(jìn)行
1，主料預(yù)濕適宜
主料預(yù)濕是否適宜對(duì)滅菌效果有明顯的影響。如預(yù)濕不透、不均勻時(shí),主料少數(shù)呈干燥狀態(tài),濕熱蒸汽就難穿透到干料中間,難達(dá)到徹底滅菌的目的。如預(yù)濕過(guò)度,會(huì)使培養(yǎng)基含水量過(guò)高,導(dǎo)致菌絲生長(zhǎng)緩慢,甚至停止生長(zhǎng)。如主料量少時(shí),可把預(yù)濕過(guò)度的料,用手?jǐn)D握至適宜的含水量,再拌入輔料。
2，滅菌前培養(yǎng)基中微生物的自繁生物量
培養(yǎng)基滅菌前,含有大量的微生物,當(dāng)原材料處于干燥條件下,它們都呈休眠或半休眠狀態(tài)。培養(yǎng)料一旦預(yù)濕,休眠或半休眠的微生物得到生長(zhǎng)繁殖所需的水分,就恢復(fù)活性,迅速增殖。氣溫高時(shí),若裝料時(shí)間拉長(zhǎng)或裝完料未及時(shí)滅菌,細(xì)菌、酵母菌等則大量繁殖,使培養(yǎng)基酸敗,滅菌難以徹底。因此,裝袋(瓶)應(yīng)盡可能快完成,裝完后立即進(jìn)行滅菌,從而控制滅菌前培養(yǎng)基中微生物的自繁生物量。
3，滅菌灶內(nèi)料袋的排放方式
滅菌時(shí),保證料瓶之間要有間隙，使?jié)駸嵴羝茌^好地在料瓶間隙之間循環(huán),使料瓶受熱均勻、滅菌徹底。近年來(lái)采用聚丙烯、低壓聚乙烯薄膜袋入灶重疊堆積后,易受擠壓,使料袋間的間隙被堵塞,滅菌時(shí)濕熱蒸汽難以穿透,受熱不均勻,不易達(dá)到徹底滅菌的效果。因此,可用木條、竹條或鋼條制作成周轉(zhuǎn)筐,再把料袋單排豎放進(jìn)筐內(nèi),各筐疊放時(shí)應(yīng)注意留有間隙,然后再進(jìn)行滅菌,或直接把料袋排放成“井”字型以減少料袋間的擠壓和增加料袋的間隙,以提高滅菌效果。
4，壓力表頭指示壓力和溫度相對(duì)應(yīng)
無(wú)論采用何種型號(hào)、結(jié)構(gòu)的高壓滅菌鍋滅菌,能否達(dá)到徹底滅菌的目的,關(guān)鍵在于壓力表頭指示的鍋內(nèi)壓力與鍋內(nèi)的溫度是否相對(duì)應(yīng)。當(dāng)鍋內(nèi)壓力已達(dá)到滅菌所需的壓力(如13.83×104Pa),而鍋內(nèi)溫度未達(dá)到對(duì)應(yīng)的溫度(126℃)時(shí),這種情況主要是由于鍋內(nèi)冷空氣未完全排除所致,鍋內(nèi)的蒸汽實(shí)際壓力并達(dá)不到表頭的指示壓力,導(dǎo)致滅菌不徹底。
5，培養(yǎng)基成分
油脂、糖類、蛋白質(zhì)會(huì)增加微生物的耐熱性,因?yàn)楦邼舛鹊挠袡C(jī)物包裹在材料顆粒周圍形成一層薄膜,影響熱量的傳遞。如廢棉含有油脂,滅菌時(shí)需適當(dāng)提高滅菌壓力或滅菌溫度(14.71× 104Pa, 128℃ , 2h),而木屑或棉籽殼培養(yǎng)基則需14.71× 104Pa, 128℃ , 1～ 1.5h。常采用提高溫度、縮短滅菌時(shí)間的辦法來(lái)達(dá)到既滅菌徹底、又盡量減少營(yíng)養(yǎng)成分損失的目的,因此在高壓滅菌前,應(yīng)掌握各種類型固體培養(yǎng)基滅菌所需的溫度和時(shí)間。
6，培養(yǎng)基的pH值
pH值對(duì)微生物的耐熱性影響很大。pH6～ 8時(shí),微生物不易死亡; pH小于6時(shí),氫離子極易侵入微生物細(xì)胞,改變細(xì)胞的生理反應(yīng),促進(jìn)細(xì)胞死亡,所以,pH值低的培養(yǎng)基,在相同的壓力下,所需滅菌時(shí)間可以適當(dāng)縮短。但通過(guò)滅菌,培養(yǎng)基的pH值會(huì)降低0.2～ 0.3,因此配培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)把pH值適當(dāng)調(diào)高一點(diǎn)。
7，培養(yǎng)基的顆粒大小和孔隙度
培養(yǎng)基的顆粒越大,滅菌時(shí)蒸汽穿透顆粒所需要的時(shí)間越長(zhǎng),且顆粒在袋(瓶)內(nèi)的孔隙度也越高,致使料袋(瓶)內(nèi)空氣量增加,而空氣是不良的熱傳導(dǎo)介質(zhì),影響蒸汽的傳導(dǎo),所以麥粒、木粒、木條型的培養(yǎng)基滅菌需要的壓力為14.71× 104Pa,保持2h以上才能滅菌徹底,因此用這些材料配制培養(yǎng)基時(shí),通常填充些木屑、麩皮或稻草粉等以減少孔隙度。草料培養(yǎng)基具有一定彈性,孔隙度也較高,裝料過(guò)程中需盡可能壓實(shí),保持14.71× 104Pa, 1.5h即可徹底滅菌。
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