細(xì)胞培養(yǎng)說復(fù)雜也復(fù)雜，說簡單也簡單，細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境保持、培養(yǎng)基的選擇以及復(fù)蘇細(xì)胞都是至關(guān)重要，今天就來分享細(xì)胞培養(yǎng)需要哪些基本條件。
1、合適的細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)基是維持體外細(xì)胞生存和生長的溶液，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室一般都用的是合成培養(yǎng)基，合成培養(yǎng)基現(xiàn)已有DMEM,1640，IMDM,L15等，不同的細(xì)胞來使用不同種類的培養(yǎng)基，比如貼壁細(xì)胞大多都可以用DMEM來培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞則大多用1640培養(yǎng)。
2、血清的品質(zhì)
人工合成的培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存，要想細(xì)胞生長和繁殖，還需補(bǔ)充優(yōu)質(zhì)血清來增加養(yǎng)分。血清是培養(yǎng)基里最重要的成分之一，含有細(xì)胞生長所需的多種生長因子及營養(yǎng)成分。
3、無菌無毒的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境
培養(yǎng)環(huán)境無菌無毒是保證培養(yǎng)細(xì)胞生存的首要條件。人體內(nèi)有強(qiáng)大的免疫系統(tǒng)和解毒器官，所以當(dāng)有毒物質(zhì)侵入體內(nèi)時，免疫系統(tǒng)和肝臟等器官可以對他們進(jìn)行抵抗和清除。但是細(xì)胞在體外培養(yǎng)就失去了抵抗能力，一旦被污染細(xì)胞就會死亡，所以保持無菌無毒的環(huán)境是體外培養(yǎng)細(xì)胞最基本的條件。
4、恒定的細(xì)胞生長溫度
要維持細(xì)胞增殖和生長，要有合適的溫度。目前大部分實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的細(xì)胞主要都是人、大鼠、小鼠、豬等哺乳動物的細(xì)胞，一般的細(xì)胞培養(yǎng)溫度都是在37℃左右，在這種溫度下細(xì)胞才可以生長和正常代謝。溫度偏高時，高于39℃或者更高會對細(xì)胞造成損傷甚至是死亡；溫度偏低時，不低于0℃雖然會影響細(xì)胞代謝和生長狀態(tài)，但是不會使細(xì)胞死亡，恢復(fù)溫度后大部分細(xì)胞都可以恢復(fù)生長特性。極少數(shù)實(shí)驗(yàn)室有昆蟲細(xì)胞比如SF9、hi-five等需要在28℃的環(huán)境培養(yǎng)，具體培養(yǎng)溫度一定要關(guān)注細(xì)胞庫及相應(yīng)說明書信息。
5、合適的氣體環(huán)境
合適的氣體環(huán)境也是細(xì)胞生存的條件之一，所需要的氣體有O?和CO?。O?產(chǎn)生能量使細(xì)胞生長增殖和合成各種所需成分，CO?是細(xì)胞代謝物也是細(xì)胞所需要的成分，它的主要作用是維持培養(yǎng)基的pH。大部分培養(yǎng)基都是把細(xì)胞放置于95%的空氣和5%的CO?的混合氣體中，但L15培養(yǎng)基作為單獨(dú)設(shè)計的培養(yǎng)體系，需要直接在100%空氣條件下培養(yǎng)細(xì)胞，若通入5%二氧化碳則會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH偏酸性從而使細(xì)胞狀態(tài)變差或者死亡。
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