實(shí)驗(yàn)室微生物污染類型及實(shí)驗(yàn)室污染解決辦法！
小楊 / 2023-06-13 08:57:30
百歐博偉生物：實(shí)驗(yàn)室污染雖然無法完全消除，但可以通過全面了解其來源并遵循良好的無菌技術(shù)來降低污染的發(fā)生頻率和嚴(yán)重性。這里將概述主要的生物污染類型以及一種新型的實(shí)驗(yàn)室微生物污染解決辦法。
1、細(xì)菌
細(xì)菌是一大類普遍存在的單細(xì)胞微生物。細(xì)菌的直徑通常只有幾微米，其形狀多樣，如球狀、桿狀和螺旋狀等。由于分布廣泛、生長迅速和體積大小等特點(diǎn)，細(xì)菌以及酵母和霉菌是細(xì)胞培養(yǎng)中最常見的生物污染物。細(xì)菌污染在培養(yǎng)物感染后幾天內(nèi)就很容易被肉眼觀察到；受感染的培養(yǎng)物通常會變得渾濁，有時表面會有一層薄膜。經(jīng)常還會出現(xiàn)培養(yǎng)基的pH值突然下降的情況。在低倍顯微鏡下，細(xì)菌以細(xì)小顆粒的形式出現(xiàn)在細(xì)胞之間，在高倍顯微鏡下觀察可以分辨出單個細(xì)菌的形狀。下面的模擬圖像顯示了貼壁培養(yǎng)的293細(xì)胞被大腸桿菌污染。
2、酵母
酵母是真菌界中的單細(xì)胞真核微生物，大小從幾微米（常見）到40μm（罕見）不等。與細(xì)菌污染一樣，被酵母污染的培養(yǎng)物會變得混濁，尤其是在污染的后期。被酵母污染的培養(yǎng)物，其pH值幾乎沒有變化，通常直到污染嚴(yán)重時，pH值才會升高。在顯微鏡下，酵母呈單個卵球形或球形顆粒，可能還會出芽產(chǎn)生更小的顆粒。下面的模擬圖像顯示了貼壁293細(xì)胞鋪板24小時后被酵母感染的情況。
3、黑膠蟲
黑膠蟲是一種生物還是非生物，學(xué)術(shù)界至今還有爭議。這里我們暫且將其認(rèn)作是一種微生物。黑膠蟲污染主要來源于血清。黑膠蟲的出現(xiàn)常在培養(yǎng)條件改變、細(xì)胞接種密度降低、細(xì)胞狀態(tài)不佳時顯現(xiàn)并使實(shí)驗(yàn)中斷，尤其在凍存細(xì)胞復(fù)蘇時可造成大量細(xì)胞死亡。黑膠蟲生長與細(xì)胞的生長有此消彼長的關(guān)系，即當(dāng)細(xì)胞狀態(tài)好時小黑點(diǎn)會相應(yīng)的減少；反之則增加，似乎有細(xì)胞競爭生長的關(guān)系。
黑膠蟲污染的特點(diǎn)是起初對細(xì)胞并無影響，當(dāng)達(dá)到一定數(shù)量時則會影響細(xì)胞生長。受黑膠蟲污染的細(xì)胞液通常清亮無變化，在高倍顯微鏡下可以觀察到點(diǎn)狀片狀的游動小體，做布朗運(yùn)動。
4、支原體
支原體是最小的（0.3μm）能夠自我復(fù)制的有機(jī)體，倒置顯微鏡下通常觀察不到。支原體沒有細(xì)胞壁，對常用的抗生素不敏感。支原體感染是極為不易察覺的，可能直到出現(xiàn)了可以觀察到的病變或發(fā)現(xiàn)細(xì)胞正常功能喪失的時候，才意識到是發(fā)生了支原體感染。一些生長緩慢的支原體可在培養(yǎng)物中持續(xù)存活，而不會導(dǎo)致細(xì)胞死亡，但它們可以改變培養(yǎng)體系中宿主細(xì)胞的行為和代謝。慢性支原體感染的可能表現(xiàn)包括：細(xì)胞增殖率降低、飽和密度下降以及懸浮培養(yǎng)物凝集；但是，檢測支原體污染的唯一可靠方法是通過使用熒光染色（例如Hoechst33258染色）、ELISA、PCR、免疫染色、放射自顯影或微生物測定法定期檢測培養(yǎng)物。
5、霉菌
霉菌是真菌界的真核微生物，以多細(xì)胞絲狀體生長，稱為菌絲。這些多細(xì)胞絲狀體構(gòu)成的交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)含有遺傳性相同的細(xì)胞核，被稱為集落或菌絲體。與酵母污染相似，培養(yǎng)物的pH值在污染的初期保持穩(wěn)定，然后隨著培養(yǎng)物感染程度加劇而迅速增加，并變得渾濁。在顯微鏡下，菌絲體通常呈細(xì)長的絲狀體，有時呈密集的孢子團(tuán)。許多種霉菌的孢子在休眠階段能夠耐受極其惡劣和不宜生長的環(huán)境，當(dāng)其遇到合適的生長條件時才會被激活。
6、病毒
病毒是一種微小的感染性病原體，利用宿主細(xì)胞的結(jié)構(gòu)進(jìn)行繁殖。它們的體積極小，難以在培養(yǎng)中被檢測到，也難以從細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室使用的試劑中去除。由于大多數(shù)病毒對宿主有非常嚴(yán)格的要求，因此，它們通常不會對宿主以外物種的細(xì)胞培養(yǎng)物產(chǎn)生不良影響。但被病毒感染的細(xì)胞培養(yǎng)物會對實(shí)驗(yàn)室人員造成嚴(yán)重的健康威脅，尤其是當(dāng)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的是人類或靈長類的細(xì)胞時。要檢測細(xì)胞培養(yǎng)物是否被病毒感染，可以使用電子顯微鏡觀察、用抗體組合進(jìn)行免疫染色、ELISA檢測或是使用合適的病毒引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
7、交叉污染
雖然不如微生物污染普遍，但許多細(xì)胞系與HeLa以及其他快速生長細(xì)胞系之間的廣泛交叉污染已經(jīng)是一個明確的問題，會產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。從值得信賴的細(xì)胞庫中獲取細(xì)胞系，定期檢查細(xì)胞系的特性，并使用良好的無菌技術(shù)進(jìn)行操作，這些做法都將幫助您避免交叉污染。DNA指紋圖譜分析、核型分析和細(xì)胞亞型分析可以確定細(xì)胞培養(yǎng)物中是否存在交叉污染。
8、使用抗生素
請勿在常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中使用抗生素，因?yàn)榭股氐倪B續(xù)使用會促進(jìn)耐藥菌株的生長，并導(dǎo)致輕度污染持續(xù)存在。一旦將抗生素從培養(yǎng)基中去除，就會發(fā)展成大規(guī)模污染?？股氐某掷m(xù)使用還可能掩蓋支原體感染和其他隱性污染。此外，某些抗生素可能會與細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)，干擾正在研究的細(xì)胞過程。抗生素只能作為對付污染的最后手段且只能短期使用，并應(yīng)盡快從培養(yǎng)物中去除。如果長期使用抗生素，則應(yīng)同時進(jìn)行無抗生素培養(yǎng)，作為檢測隱性感染的對照。
你知道如何預(yù)防實(shí)驗(yàn)室微生物污染嗎？
消毒是實(shí)驗(yàn)室工作中最重要的措施，可以有效阻斷病毒、細(xì)菌或其他有害物質(zhì)的傳播，是維持實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生安全的重要策略。
實(shí)驗(yàn)室工作人員在進(jìn)行清潔消毒時，必須選擇合適的清潔和消毒方法，以確保實(shí)驗(yàn)室的衛(wèi)生安全。過氧化氫消毒法是一種有效的消毒方法，在實(shí)驗(yàn)室空氣消毒，表面和容器消毒，以及新工具的消毒方面應(yīng)用較多，以有效地抑制實(shí)驗(yàn)室菌落。
過氧化氫消毒是指將一定量過氧化氫（正在水中分解）和活性碳添加到實(shí)驗(yàn)室，用來殺滅細(xì)菌、真菌、病毒等病原體。過氧化氫是一種化學(xué)殺菌劑，它可以通過與微生物的蛋白質(zhì)和多糖酶反應(yīng)，從而破壞微生物的結(jié)構(gòu)和功能，從而達(dá)到消毒的目的。過氧化氫消毒是有效且安全的。
首先，過氧化氫消毒能有效抑制各種微生物從而達(dá)到消毒和清潔的目的，這是一種非常有效的清潔和消毒方法，適用于實(shí)驗(yàn)室清潔消毒。過氧化氫消毒有特殊的抗菌作用，可有效得抑制各種微生物，而且能有效抗擊革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌和真菌，在實(shí)驗(yàn)室空氣消毒，表面和容器消毒，以及新工具的消毒方面，過氧化氫消毒的滅菌效果非常出色，能有效避免空氣中的各種有害物質(zhì)對實(shí)驗(yàn)研究的影響，從而實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室的衛(wèi)生安全保障。
此外，過氧化氫消毒對各種實(shí)驗(yàn)室消毒場合都有較好的表現(xiàn)。無論是在抹布、手持工具、新研發(fā)的工具上，還是在手洗臺或洗衣服的地方，過氧化氫的均勻、完整的成分，既能清除有害的微生物，又能減少由于實(shí)驗(yàn)室污染和積聚的有害物質(zhì)，使實(shí)驗(yàn)室的靜電環(huán)境更平穩(wěn)，從而提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。
最后，過氧化氫消毒的劇毒性低，令人放心，毒性極低，就連體內(nèi)代謝也不存在安全隱患，不會對人體健康造成任何影響；并且過氧化氫消毒都通過了SGS認(rèn)證（中國內(nèi)澇中心），是安全無害的清潔和消毒劑，可以放心使用。
總之，為了做到清潔消毒正確，保證衛(wèi)生安全，實(shí)驗(yàn)室工作人員在選擇清潔消毒方法時，應(yīng)首選過氧化氫消毒。由于過氧化氫消毒的安全性，有效性，高效性和劇毒性低，既能起到清除微生物的作用，也能防止實(shí)驗(yàn)室空氣污染，從而保證實(shí)驗(yàn)室的安全性和衛(wèi)生安全。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有Biolog微生物鑒定系統(tǒng)，超低溫冰箱，生物安全柜等儀器設(shè)備可進(jìn)行對微生物分離、鑒定等常規(guī)的分子實(shí)驗(yàn)研究。對我國生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需求進(jìn)行積極的面對社會乃至國外收集保藏提供微生物菌種資源。在保證生物安全和保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的前提下，為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護(hù)、科研教育提供微生物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術(shù)服務(wù)。
除此之外，我們還擁有對菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對購買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得最優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因?yàn)榇?，北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！