高壓蒸汽滅菌溫度和時間的具體控制原則與常見參數(shù)！
小楊 / 2026-01-09 09:52:32
百歐博偉生物：高壓蒸汽滅菌的溫度和時間控制是確保滅菌效果的核心，需根據(jù)滅菌物品的類型、性質(zhì)及污染程度靈活調(diào)整，以下是具體的控制原則和常見參數(shù)：
一、核心控制依據(jù)：溫度、壓力與時間的協(xié)同關(guān)系
高壓蒸汽滅菌的原理是通過提高密閉容器內(nèi)的蒸汽壓力，使蒸汽溫度超過 100℃（常壓沸點(diǎn)），從而增強(qiáng)殺菌能力。壓力與溫度呈正相關(guān)，常見對應(yīng)關(guān)系如下：
壓力 103.4kPa（1.05kg/cm²）→ 溫度 121℃
壓力 137.3kPa（1.40kg/cm²）→ 溫度 126℃
壓力 162.6kPa（1.66kg/cm²）→ 溫度 130℃
實(shí)際操作中，需先通過排氣（排除冷空氣）確保滅菌鍋內(nèi)為純蒸汽環(huán)境，否則即使達(dá)到壓力，溫度也可能不達(dá)標(biāo)（如殘留冷空氣會導(dǎo)致“假壓力”，實(shí)際溫度低于設(shè)定值）。
二、不同場景的溫度和時間參數(shù)
1、常規(guī)物品（最常用）
適用對象：培養(yǎng)基（如改良馬丁瓊脂、營養(yǎng)瓊脂）、玻璃器皿（試管、錐形瓶）、手術(shù)器械、敷料等。
參數(shù)：121℃，維持 20~30 分鐘（從達(dá)到設(shè)定溫度開始計(jì)時）。
原理：121℃時，微生物蛋白質(zhì)變性速度快，20 分鐘可殺滅包括芽孢在內(nèi)的所有微生物，30 分鐘用于體積較大的物品，確保內(nèi)部達(dá)到滅菌溫度。
2、耐高溫且污染嚴(yán)重的物品
適用對象：含大量芽孢的樣品（如土壤標(biāo)本、污水）、污染嚴(yán)重的器械。
參數(shù)：121℃，延長至 40~60 分鐘；或 132℃，維持 3~5 分鐘（快速滅菌，需專用高壓滅菌鍋）。
原理：更高溫度或更長時間可應(yīng)對高濃度污染物，避免滅菌不徹底。
3、熱敏性物品（需低溫滅菌）
適用對象：含維生素、酶、血清等熱敏成分的培養(yǎng)基，或某些塑料器皿（如聚碳酸酯材質(zhì)）。
參數(shù)：115℃（壓力 68.9kPa），維持 30 分鐘。
注意：需確認(rèn)物品耐高溫上限，若溫度超過其耐受范圍（如某些塑料在 121℃會變形），需改用其他滅菌方式（如過濾滅菌）。
4、大容量或高黏度物品
適用對象：1000ml 以上的培養(yǎng)基、含大量固體顆粒的溶液（如污泥懸液）。
參數(shù)：121℃，根據(jù)體積延長時間（如 1000ml 需 30~40 分鐘，2000ml 需 50~60 分鐘）。
原理：大容量或高黏度液體傳熱慢，需延長時間確保內(nèi)部達(dá)到滅菌溫度。
三、操作中的關(guān)鍵控制步驟
排氣階段：
滅菌鍋啟動后，先打開排氣閥，排出鍋內(nèi)冷空氣（約 5~10 分鐘，至有大量蒸汽穩(wěn)定排出），再關(guān)閉排氣閥升壓。若冷空氣未排盡，即使壓力達(dá)標(biāo)，實(shí)際溫度可能僅 100~110℃，導(dǎo)致滅菌失敗。
升溫與計(jì)時：
關(guān)閉排氣閥后，鍋內(nèi)壓力和溫度逐漸上升，當(dāng)達(dá)到設(shè)定參數(shù)（如 121℃、103.4kPa）時，開始計(jì)時，嚴(yán)格維持設(shè)定時間。
降壓階段：
滅菌結(jié)束后，關(guān)閉熱源，緩慢降壓（自然冷卻或微調(diào)排氣閥，避免降壓過快導(dǎo)致培養(yǎng)基沸騰溢出）。待壓力降至 0kPa、溫度降至 80℃以下時，方可打開滅菌鍋，防止高溫蒸汽燙傷。
四、常見問題與注意事項(xiàng)
滅菌后物品再次污染：滅菌后需在無菌環(huán)境（如超凈臺）中取出物品，避免接觸污染源。
參數(shù)校準(zhǔn)：定期用溫度計(jì)、壓力計(jì)校準(zhǔn)滅菌鍋，確保顯示值與實(shí)際值一致（誤差需≤1℃）。
特殊物品處理：液體培養(yǎng)基分裝時，容器口需留空隙（避免滅菌時膨脹破裂）；玻璃器皿需干燥后滅菌（潮濕易導(dǎo)致滅菌后再次污染）。
總之，高壓蒸汽滅菌的核心是“確保純蒸汽環(huán)境 + 精準(zhǔn)控制溫度和時間”，根據(jù)物品特性選擇參數(shù)，才能既保證滅菌徹底，又避免破壞物品成分。
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