中國微生物菌種查詢網(wǎng)目前國內(nèi)，食用菌行業(yè)魚龍混雜，液體菌種更是千奇百樣，一個(gè)新興的技術(shù)，讓一部分人給炒成絕對成熟的技術(shù)，中藥標(biāo)準(zhǔn)對照品研究中心試問這些人良心何在？韓國的液體菌種設(shè)備在我國賣的也不少，但是實(shí)際使用怎么樣，誰用誰知道。。。。目前工廠化的液體品種：杏鮑菇，金針菇，北蟲草適合一般栽培的有：平菇，木耳，靈芝，白靈菇，蜜環(huán)菌，雞腿菇香菇也能用，但是成功的太少。，一些稀有菌也能制作液體菌種，但是不能栽培出子實(shí)體，比如冬蟲夏草，只能做菌絲的提取。
其實(shí)在食用菌生產(chǎn)中，成敗的關(guān)鍵是菌種；生產(chǎn)中投資成本最大也是菌種。菌種的純度、活力、培育時(shí)間和抵抗雜菌的能力決定了生產(chǎn)的成敗。要實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量、工廠化、標(biāo)準(zhǔn)化、全年候生產(chǎn)，與國際市場接軌，提高栽培效益，就必須解決目前菌種生產(chǎn)的落后方式。食用菌液體菌種能替代傳統(tǒng)菌種進(jìn)行生產(chǎn),而且能提高食用菌的產(chǎn)量和質(zhì)量,易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)[4]。本文就食用菌液體菌種培養(yǎng)技術(shù)做一綜述。
液體菌種相對傳統(tǒng)的固體菌種的優(yōu)勢所在液體菌種相對傳統(tǒng)的固體菌種有諸多優(yōu)勢：菌種培養(yǎng)時(shí)間短,以平菇為例，1級(jí)～3級(jí)菌種的培養(yǎng)時(shí)間分別為7天、23天和25天，總計(jì)需要60天左右，液體菌種僅需10天左右，即使將設(shè)備排空后的清洗、檢修等包括在內(nèi)，也不會(huì)超過15天;污染易被檢出，液體菌種培養(yǎng)期間設(shè)備完全處于密封狀態(tài)，一旦發(fā)生污染，其氣味，色澤都會(huì)發(fā)生變化，生產(chǎn)期間易被檢出，所以相對固體菌種而言發(fā)生污染和隱性污染的概率更低，產(chǎn)出的菌種純度更高；由于液體菌種培養(yǎng)時(shí)間短，菌齡高度一致，播種后菌種萌發(fā)一致，不存在“老幼不齊”的現(xiàn)象；液體菌種接于固體料上定植快,液體菌種具有流動(dòng)性、易分散、菌絲片斷多、菌絲活力強(qiáng)等特點(diǎn)，接入固體培養(yǎng)基中后,分布于整個(gè)培養(yǎng)基表面。
因此，菌絲萌發(fā)快,吃料也快,萌發(fā)點(diǎn)多,分散度也較大,菌絲在培養(yǎng)料中呈立體生長模式。研究表明,在適宜的溫度下,500ml的原種瓶裝干料150g,接入液體菌種后5～18天菌絲可長滿瓶,比接固體菌種可提前天5～7天。另外，在高溫制種季節(jié),用液體菌種接入瓶裝料其污染率可控制在1%以下,接入袋裝料其污染率可控制在4%以下；有研究表明使用食用菌液體菌種跟傳統(tǒng)的固體菌種相比，用液體菌種栽培的產(chǎn)量及生物轉(zhuǎn)化率是常規(guī)栽培的4倍多,差異極為顯著。綜上各個(gè)優(yōu)點(diǎn)液體菌種更適合于大規(guī)模生產(chǎn)使用食用菌液體菌種也易于實(shí)現(xiàn)食用菌的工業(yè)化和標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn),從而從根本上改變過去手工作坊式的生產(chǎn)和從試管→瓶子→小袋→大袋的落后的生產(chǎn)方式,實(shí)現(xiàn)一條新型的食用菌菌種生產(chǎn)工藝。
液體菌種培養(yǎng)的具體方法培養(yǎng)基配方的選擇無論是利用哪種液體菌種的培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)基的配方至關(guān)重要，每一種培養(yǎng)基的組成中都離不開碳、氮、無機(jī)鹽、微量元素、維生素和生長素等。要根據(jù)所培養(yǎng)的對象食用菌通過培養(yǎng)基的篩選實(shí)驗(yàn)選擇合適的碳源和氮源以及合適的碳氮比。許多無機(jī)鹽及微量元素對菌種的生理過程的影響與其濃度有關(guān)。不同的菌種，對無機(jī)鹽及微量元素要求的最適濃度也不同，同樣可以通過培養(yǎng)基篩選實(shí)驗(yàn)來確定最佳無機(jī)鹽配方。培養(yǎng)基中常需要添加磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素B1等。
發(fā)酵罐深層發(fā)酵技術(shù)利用深層發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行液體菌種生產(chǎn)包括發(fā)酵罐的清洗和檢查→煮罐、空氣過濾器及無菌水滅菌→配料→上料→滅菌→冷卻、并瓶→接種→培養(yǎng)等環(huán)節(jié)。培養(yǎng)環(huán)節(jié)屬于全自動(dòng)化過程，過程中需要檢測發(fā)酵液質(zhì)量。這種生產(chǎn)技術(shù)對基礎(chǔ)設(shè)備要求高，除發(fā)酵罐外配套的相關(guān)設(shè)備有空氣壓縮機(jī)、空氣過濾器、高壓蒸汽滅菌鍋、超凈工作臺(tái)、顯微鏡、恒溫培養(yǎng)箱等。由于這種生產(chǎn)技術(shù)設(shè)備投資大,技術(shù)要求高,適合大型工廠化生產(chǎn)采用。但由于設(shè)備投入成本過高等各種因素影響,目前應(yīng)用于制種其效益不佳,不適合一般制種單位及個(gè)體戶采用.
搖瓶培養(yǎng)液體菌種技術(shù)這種方法用的設(shè)備主要是搖床分為往復(fù)式及旋轉(zhuǎn)式兩種,投資需幾千元。其技術(shù)要求較發(fā)酵罐要低一些,容易掌握,適合一般的制種單位和大型個(gè)體戶。整個(gè)生產(chǎn)流程包括培養(yǎng)基配制分裝→消毒→冷卻→接種→搖床培養(yǎng)→一級(jí)液體種→二級(jí)液體種→接固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)液配制好后，裝入三角燒瓶中，裝量為三角燒瓶容量的1/5，并加入0～15粒小玻璃珠，滅菌過后接入一塊約2平方厘米的斜面菌種，再靜置培養(yǎng)48小時(shí)，再置往復(fù)式搖床上振蕩培養(yǎng)，振蕩頻率、振幅根據(jù)對象食用菌而定，一般為80～100次/分，6cm～10cm。如果用旋轉(zhuǎn)式搖床，振蕩頻率為200～220轉(zhuǎn)／分。搖床室溫控制在24℃～25℃，培養(yǎng)時(shí)間因菌類不同而異，一般是在7天左右。同樣培養(yǎng)過程中需要時(shí)刻監(jiān)測菌種的質(zhì)量。
菌種質(zhì)量監(jiān)測生產(chǎn)過程中發(fā)酵液的質(zhì)量檢測是必不可少的一項(xiàng)，菌液顏色和氣味是否正常是檢測發(fā)酵液質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)。正常情況下，菌液初期略顯渾濁，隨著發(fā)酵的進(jìn)行逐漸變?yōu)榍宄?，菌液顏色越來越淡；若有污染發(fā)生，菌液始終處于混濁狀態(tài)，菌球與菌液的界限不明顯，且發(fā)酵液顏色有異常變化。培養(yǎng)初期，菌液有培養(yǎng)基的香味，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長會(huì)越來越淡，后期呈菌絲的氣味；若染菌或菌種質(zhì)量不好，會(huì)有酸、臭、酒味或其他異常的氣味。因而在菌種培養(yǎng)過程中，工作人員要經(jīng)常聞一聞排氣口排出的氣味是否有異常。
發(fā)酵終點(diǎn)的判定這直接關(guān)系到生產(chǎn)的液體菌種的數(shù)量和質(zhì)量，發(fā)酵時(shí)間過短不僅會(huì)造成資源浪費(fèi)菌種發(fā)酵也未達(dá)到最佳狀態(tài)，發(fā)酵時(shí)間過長，營養(yǎng)消耗過度，會(huì)使菌體活力下降，甚至菌絲發(fā)生自溶?？梢酝ㄟ^菌球形態(tài)、密度及菌液顏色、氣味等指標(biāo)進(jìn)行初步判斷。食用菌進(jìn)行分批培養(yǎng)時(shí)遵循微生物生長曲線規(guī)律，即有延滯期、對數(shù)生長期、穩(wěn)定期、衰亡期，其中對數(shù)生長期的菌絲體生活力最旺盛，是放罐接種的最佳時(shí)期。實(shí)踐表明，培養(yǎng)72h形成活力最盛的菌球，直徑約0.3cm，菌球濃度約80%～85%[1]3.液體菌種固化技術(shù)液體菌種較固體菌種有諸多優(yōu)點(diǎn)，為食用菌生產(chǎn)的規(guī)?；该髁朔较?，但是液體菌種儲(chǔ)存時(shí)間短，不易保存的特性，這一特性提高了液體菌種的生產(chǎn)成本，制約了液體菌種的進(jìn)一步的推廣應(yīng)用。近年來有研究者提出將液體菌種同固體基質(zhì)進(jìn)行混合，形成固化菌種從而提高液體菌種的保存時(shí)間。食用菌液體菌種固化技術(shù)，可有效解決液體菌種的上述缺點(diǎn)。在優(yōu)選的蔗糖、豆餅粉液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)香菇856，將得到的菌絲球與優(yōu)選的
主要成分是棉籽殼的固化載體基質(zhì)按l：6的比例混合，制成固化菌種，室溫保藏30d，與保藏0d的固化菌種相比，呼吸強(qiáng)度低，纖維素酶活力明顯升高，萌發(fā)力強(qiáng)，菌絲生長快。[5]另外還有研究者對固化菌種的生產(chǎn)成本進(jìn)行了估算，按照本試驗(yàn)中的菌種固化方法及模擬的生產(chǎn)規(guī)模，計(jì)算出的平菇固化菌種生產(chǎn)成本為0.755元/千克，每千克比平菇常規(guī)菌種的生產(chǎn)成本0.9元低0.145元，減低比例達(dá)19.2％，具有明顯的經(jīng)濟(jì)效益
液體菌種生產(chǎn)技術(shù)新走向——還原型液體菌種，還原型液體菌種不同于通常的發(fā)酵液體菌種，它是將利用尖端生物工程技術(shù)生產(chǎn)的菌絲塊進(jìn)行粉碎、稀釋后做成的菌種。有實(shí)驗(yàn)證實(shí)這種菌種200克的菌絲塊可以接種5萬瓶，生產(chǎn)2噸食用菌，眾所周知食用菌生產(chǎn)過程中要使用大量菌種，生產(chǎn)環(huán)節(jié)中成本最高的就是菌種，還原型液體菌種技術(shù)能夠使用極少量的菌種生產(chǎn)大量食用菌極大的降低了生產(chǎn)成本，無疑是技術(shù)上的革新，可能成為將來食用菌生產(chǎn)技術(shù)新的發(fā)展方向。還原型液體菌種還有諸多優(yōu)點(diǎn)：比如說可以任意選擇菌絲濃度、培養(yǎng)與生育時(shí)間縮短。以金針菇為例，利用固體木屑種生長周期為55天，利用發(fā)酵液體菌種為48天．而利用還原型液體菌種為42天。初期投資成本低，只需要接種機(jī)、接種罐、菌絲塊攪拌機(jī)及簡易無菌箱。由于不需要液體發(fā)酵罐進(jìn)行深層培養(yǎng)，即可以有效控制菌種來源的污染，解決了使用液體菌種污染率高的問題，綜上優(yōu)點(diǎn)還原型液體菌種具有很高的推廣價(jià)值。[6]5.液體菌種新的層面上的應(yīng)用
液體菌種的應(yīng)用早就跳出了只用于生產(chǎn)食用菌子實(shí)體的層面，在新世紀(jì)里早就得到了更高層面的應(yīng)用。從食用菌液體菌種發(fā)酵產(chǎn)物中可提取出多種生理活性物質(zhì)，如多糖、酚類、萜類化合物、多肽、生物堿、維生素、核酸、酶、氨基酸、甾醇、具抗生素作用的化合物以及植物激素等，液體菌種中提取的真菌多糖也是廣泛銷售的保健品；食用菌菌種在液體培養(yǎng)過程中會(huì)產(chǎn)生多種生理活性物質(zhì)具有抗癌、抗病菌、抗病毒、抗衰老、消除炎癥、提高機(jī)體免疫力等醫(yī)療保健功效，某些利用液體培養(yǎng)菌絲體制造的食用菌藥物已經(jīng)上市如靈芝菌片、蜜環(huán)片、寧心寶膠囊等；以食用菌為原料，利用其他一些農(nóng)副產(chǎn)品進(jìn)行食用菌液體菌種培養(yǎng)生產(chǎn)的菌絲體飲料或加強(qiáng)型飲料，據(jù)報(bào)道這種飲料味道鮮美，營養(yǎng)豐富；利用食用菌的菌絲體含有高蛋白的特點(diǎn)用來生產(chǎn)綠色食品添加劑。利用液體菌種培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)食用菌營養(yǎng)品、保健品、藥品或其他生物制品將是食用菌產(chǎn)業(yè)開發(fā)的新領(lǐng)域，有著十分廣闊的發(fā)展前景。