目的 探討苦丁茶對五種常見細菌的體外抑菌效果。方法 用瓊脂擴散法和試管稀釋法測定苦丁茶湯劑對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、變形桿菌、白色念珠菌、新生隱球菌五種病原菌的體外抑菌作用。結(jié)果 苦丁茶對所測病原菌的最小抑菌濃度(MIC)為：金黃色葡萄球菌100mg/ml， 表皮葡萄球菌50mg/ml，變形桿菌100mg/ml，白色念珠菌、新生隱球菌均>100mg/ml。結(jié)論 金黃色葡萄球菌對苦丁茶均呈中度敏感，表皮葡萄球菌對苦丁茶呈高度敏感，變形桿菌對苦丁茶呈低度敏感，白色念珠菌、新生隱球菌對苦丁茶均呈耐藥。
苦丁茶又名皋盧、瓜盧，是一種純天然綠色飲品。遠在東漢時的《桐君錄》（已經(jīng)遺失）中就曾記載作為貢品供皇家享用。民間記載具有清熱解毒、消炎利便、解酒功能，對咽喉腫痛、口腔炎、牙齦炎、便秘等疾病效果顯著，但其藥理學研究不多，我們研究了苦丁茶的抗菌作用，現(xiàn)報告如下。
1 實驗材料
1.1 試驗藥物
苦丁茶水煮濃縮液。藥物制備：100g苦丁茶加10倍量蒸餾水小火煮沸2次，每次1h，合并2次水煮液，四層紗布過濾，濃縮至100g/100ml，調(diào)整pH至7.0～7.2，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?br />
1.2 菌種
所用菌種為金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、變形桿菌、白色念珠菌、新生隱球菌（由中國藥品生物制品鑒定所提供，其中金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌為耐青霉素類藥物菌株）。菌種的培養(yǎng)及菌液的配制: 金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、變形桿菌用MH瓊脂平板培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)18h；白色念珠菌、新生隱球菌用沙保弱瓊脂平板培養(yǎng)，28℃培養(yǎng)48～72h備用。菌液取細菌生理鹽水用0.5麥氏管比濁配成。
1.3 培養(yǎng)基制備
MH瓊脂按平板常規(guī)方法制備：MH瓊脂38g/蒸餾水1000ml；MH肉湯按常規(guī)方法制備：MH肉湯27g/蒸餾水1000ml；沙保弱瓊脂培養(yǎng)基制備：沙保弱瓊脂27g/蒸餾水1000ml。
1.4 試驗器材
打孔器、高壓蒸汽滅菌器、冰箱、恒溫培養(yǎng)箱、無菌工作臺等。
2 試驗方法
本試驗同時采用瓊脂擴散法和試管稀釋法用苦丁茶對各菌株進行抑菌試驗，觀察苦丁茶對五種病原菌的抑菌效果。
2.1 瓊脂擴散法
用滅菌棉簽蘸取供試菌液（0.5麥氏管比濁），均勻涂布于MH瓊脂平板上，然后用直徑6mm的瓊脂打孔器均勻打孔，每板4孔，去除孔內(nèi)瓊脂并適當封閉孔底。將供試藥液加于孔中，以滿而不溢為宜并作好標記，并且以MH肉湯作為陰性對照。置4℃冰箱中作用1h后取出。金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球、變形桿菌置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)18～24h，白色念珠菌、新生隱球菌28℃培養(yǎng)48h，觀察結(jié)果。
2.2 試管稀釋法
取無菌試管6支，第1管加入1.8ml MH肉湯，2～5管加入1ml MH肉湯。以無菌操作吸取已制備好的供試藥液0.2ml加入第1管中，混勻后吸取1ml加入第2管中，依次倍比稀釋至第5管棄去1ml，第6管加入2ml MH肉湯作為對照管。每管加入菌液50μl。細菌37℃培養(yǎng)18～24h，真菌培養(yǎng)48～72h后觀察結(jié)果。能夠完全抑制細菌生長的最小藥物濃度為最小抑菌濃度（MIC）。
3 實驗結(jié)果
3.1 瓊脂擴散法實驗結(jié)果
為了使實驗結(jié)果一目了然，瓊脂擴散法實驗結(jié)果的判斷采用《中藥制用經(jīng)驗錄》的方法［4］表示。即抑菌環(huán)直徑在0.8cm或以下的，記（-）號，為不敏感；抑菌環(huán)直徑在0.8～1.30cm，記（+）號，為低度敏感；抑菌環(huán)直徑在1.31～1.90cm，記（++）號，為中度敏感；抑菌環(huán)直徑在1.91～2.5cm，記（+++）號，為高度敏感。
3.2 試管稀釋法實驗結(jié)果
苦丁茶對所測病原菌的MIC
4 討論
本實驗用瓊脂擴散法對苦丁茶的抑菌作用作了定性檢定，然后用試管稀釋法對其藥理活性進行定量分析，苦丁茶對五種細菌的抑菌作用用瓊脂擴散法和試管稀釋法得到的結(jié)果相符。以對表皮葡萄球菌的抑菌作用最強，對金黃色葡萄球菌、變形桿菌次之，對白色念珠菌、新生隱球菌兩種真菌的效果較差或未見抑菌作用，為臨床防治所試敏感病原菌感染提供了一定的實驗依據(jù)。另本實驗用的金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌均為耐青霉素類藥物菌株，苦丁茶對兩者的效果均很好，這就為苦丁茶在臨床抗耐藥菌上發(fā)揮作用提供了依據(jù)。
由實驗結(jié)果可知苦丁茶對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、變形桿菌抑菌效果較為明顯。金黃色葡萄球菌的抑菌效果和有關(guān)文獻報道相符，但上述報道中的金黃色葡萄球菌并不是耐青霉素類藥物菌株，表皮葡萄球菌、變形桿菌未見報道，這些是我們比前面報道新穎的地方。同時據(jù)報道苦丁茶對甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎球菌、白喉桿菌、痢疾桿菌有明顯效果，本實驗為苦丁茶在咽喉腫痛、口腔炎、牙齦炎、便秘、痢疾等金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、變形桿菌感染疾病的治療提供了依據(jù)。用苦丁茶含服或喝苦丁茶液可以達到很好的療效。