Hunter微量元素溶液配置方法
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2019-04-03 14:15:53
TAP培養(yǎng)基是比較難配置的藻類培養(yǎng)基之一，其中的Hunter微量元素貯存液（Hunter’s trace elements）是非常常用的微生物培養(yǎng)基添加劑，為微生物的生長提供必需的微量元素。Hunter’s微量元素溶液配方是Hunter等人1950年發(fā)表的，至今配方在很多不同微生物培養(yǎng)基中都有使用，包括衣藻、曲霉等。Hunter微量元素貯存液常用來配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
Hunter’s trace elements配制起來十分復(fù)雜，且由于其中有易氧化的亞鐵離子和二價錳離子，因此有效的配制方法非常重要，否則配制出來的溶液則起不到應(yīng)有的效果。
Hunter’s微量元素溶液配方與配制方法
1000X Hunter微量元素溶液的配方如下：
標(biāo)準(zhǔn)配制方法：
1. 除EDTA外，將以上溶液混合，加熱煮沸，加入EDTA溶液。此時溶液應(yīng)該為綠色。
2. 待溫度降至70度時，加入80ml 20%氫氧化鉀溶液（預(yù)熱）。
3. 待溶液溫度冷卻至室溫時定容至1L 。
4. 用錐形瓶盛裝配制好的Hunter’s trace elements，用棉花塞堵住瓶口。每天晃動一次，使空氣流通?；蛴?0ml移液管反復(fù)吹打溶液，效果更佳。如此持續(xù)1~2周。
5. 用兩層濾紙過濾Hunter微量元素貯存液，濾出溶液應(yīng)該是清澈的，否則再過濾一次，直到最終溶液澄清為止。
6. 將溶液分裝后低溫保存。此方法法可放大。
新配的Hunter微量元素溶液是淺綠色，透明，放置一段時間后逐漸變成深紅色，最終為紫色，并且在溶液底部生成鐵銹色沉淀。如果沒有沉淀生成，檢測pH，用氫氧化鉀或鹽酸調(diào)節(jié)至6.7。
Hunter’s trace elements終溶液應(yīng)該是波爾多酒紅色，或棗紅色。但pH的微小變動會影響溶液顏色。作者補(bǔ)充說，自己曾配制過一批葡萄紫色的，并沒有影響效果。
Scott和Kafer對Hunter微量元素溶液的配制方法做了改良，以下是改良后的配制方法：
溶液A的配制：
1. 稱取以上組分，按照給出的順序，依次加入到80ml去離子水中。不能用自來水，不能用純凈水！
2. 用KOH顆粒調(diào)節(jié)pH至5.5。不能用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH！
配制好的溶液A呈金黃色，透明。
溶液B的配制：
稱取以上組分，按照給出的順序，依次加入到80ml去離子水中，溫和加熱攪拌至完全溶解。
將溶液A和溶液B混合，先用KOH顆粒，再用KOH溶液調(diào)節(jié)pH至6.5，定容至200ml。放4度冰箱中保存。不能用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH！
Hunter’s trace elements終溶液配制方法
與傳統(tǒng)配制方法一樣，剛剛配制好的溶液呈淺綠色，透明。放置2周后Hunter微量元素溶液應(yīng)該變成紫色，但不會形成沉淀。此時溶液才能使用。即使有沉淀形成也不會影響使用，相反，有沉淀存在效果會更好。如果沒有以上現(xiàn)象出現(xiàn)，棄掉，重新配制。
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