THP-1人急性單核細胞白血病細胞培養(yǎng)條件及傳代方法！
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2019-03-04 08:52:28
細胞名稱：THP-1 ， 人急性單核細胞白血病細胞
細胞庫編號：bio-73174
種屬：人
年齡（性別）男
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：單核細胞
背景描述：THP-1細胞對乳汁珠和激活的紅細胞有吞噬作用，無表面和胞質(zhì)免疫球蛋白。THP-1細胞可以用佛波醇、TPA誘導單核細胞分化。
生長培養(yǎng)基：RPMI-1640(貨號:PM150110)＋10% FBS(貨號:164210-500)＋0.05mM β-mercaptoethanol(貨號:PB180633)＋1% P/S(貨號:PB180120)
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
組織來源：單核細胞
細胞特性：該細胞建立自一名患有急性單核細胞白血病的1歲男孩的外周血的單核細胞。對乳膠顆粒和激活的紅細胞有吞噬作用，細胞膜和細胞質(zhì)內(nèi)均沒有免疫球蛋白，表達C3R和FcR; 可以用佛波醇 TPA誘導向單核細胞分化。可作為轉(zhuǎn)染宿主。
生長特性：懸浮生長
形態(tài)特征：單核細胞
安全性：所有腫瘤細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。
培養(yǎng)條件：
完全培養(yǎng)基：含2mM L谷氨酰胺的PRMI-1640，加10mM HEPES，1.0mM丙酮酸鈉，4.5克/升葡萄糖，1.5克/升碳酸氫鈉，再添加10%胎牛血清和0.05mMβ-疏基乙醇。胎牛血清最好滅活。
培養(yǎng)條件：37 ℃，CO2：5%
傳代方法：
收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
用75%酒精噴灑整個培養(yǎng)瓶，放入無菌工作臺中，嚴格無菌操作。
將培養(yǎng)液和細胞全部吸入離心管中，離心（1000轉(zhuǎn)/min,10min）棄上清。
加入10ml新鮮的完全培養(yǎng)液培養(yǎng)。培養(yǎng)基的PH 不要超過7.0。
注：
1、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
2、收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯(lián)系。
凍存方法：
凍存液：90%完全培養(yǎng)液，10%DMSO
儲存：液氮儲存