一起來看看血清使用中常見的六大問題分析！
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2019-01-15 08:34:53
1、如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損
將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
長時(shí)間儲(chǔ)存在2～8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、纖粘蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清，并避免反復(fù)凍融。 建議血清應(yīng)保存在-20℃。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。
2.血清中包含絮狀沉淀，他們是什么，怎么處理？
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清（400g，1～2分鐘）或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里（一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾）。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃，沉淀會(huì)自然消失.
3、如何避免血清中產(chǎn)生沉淀？
（1）解凍血清時(shí)，隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。
（2）血清分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一。
（3）勿由-20℃直接放置于37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
（4） 勿將血清置于37℃太久，否則血清會(huì)變得渾濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。
（5） 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。
（6） 若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。
4、培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可以長期保存嗎？
一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，盡量在1個(gè)月內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞挚赡茉诮鈨龊缶烷_始降解。
5、細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎？如何處理？
在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
（1）細(xì)胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘??；
（2）血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果；
（3）配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長；
（4）配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn)；
（5）培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。
6、細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成？
（1） 盡可能地減少血清凍融次數(shù)；
（2） 培養(yǎng)基無需37℃水?。?nbsp;
（3） 培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0~7.2；
（4） 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗；
（5） 掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長過老。
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