影響質(zhì)粒在重組細菌中穩(wěn)定性的因素有哪些？
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2018-11-19 11:05:01
中國微生物菌種查詢網(wǎng)質(zhì)粒在基因工程重組菌中的穩(wěn)定性是基因工程菌實驗研究與發(fā)酵生產(chǎn)中的重要問題之一。對于一些特定的菌而言，提高質(zhì)粒的穩(wěn)定性具有非常重要的意義。
質(zhì)粒的不穩(wěn)定性是指重組菌在培養(yǎng)過程中發(fā)生突變或丟失，結(jié)果使重組菌失去了某些表型特征。根據(jù)重組質(zhì)粒的變化本質(zhì)，質(zhì)粒的不穩(wěn)定性可分為結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性和分離不穩(wěn)定性。質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性主要是由于DNA的插入、缺失或重排等引起的不穩(wěn)定性。分離不穩(wěn)定性是指細菌在分裂后分離時引起的不穩(wěn)定性，由于質(zhì)粒在子代細菌中的分配不均勻而使部分細菌不含質(zhì)粒，是質(zhì)粒丟失的主要原因。
質(zhì)粒的不穩(wěn)定性常出現(xiàn)于兩種情況：
一是傳代質(zhì)粒只在許多世代之后才明顯產(chǎn)生丟失；
二是帶有質(zhì)粒的細菌與無質(zhì)粒細菌的生長速率不同所導致。外源質(zhì)粒的存在，對宿主菌是一種代謝負擔，當外源基因大量表達時，這種代謝負擔就變得尤為嚴重。
一般情況下，帶有重組質(zhì)粒的宿主菌的生長速率低于無質(zhì)粒的細菌，由此，質(zhì)粒的穩(wěn)定性伴隨著生長速率的不同而變化?；蛑亟M菌的比生長速率對質(zhì)粒的穩(wěn)定性有很大的影響，在連續(xù)傳代培養(yǎng)時，在低比生長速率（0.302h-1）下重組質(zhì)粒只可以完全維持20代。
影響質(zhì)粒不穩(wěn)定性的因素主要有兩個：
1、宿主菌的遺傳特性
質(zhì)粒的穩(wěn)定性在很大程度上受宿主菌遺傳特性的影響。相對而言，重組質(zhì)粒在大腸桿菌中比較穩(wěn)定，在枯草芽孢桿菌和酵母菌中較不穩(wěn)定。但也有例外，有的質(zhì)粒在大腸桿菌中不穩(wěn)定，而在酵母中穩(wěn)定性很好。
2、質(zhì)粒的特性
在重組菌中，質(zhì)粒的大小與拷貝數(shù)是影響質(zhì)粒分離不穩(wěn)定的重要因素。一般較小的質(zhì)粒穩(wěn)定性也較好。質(zhì)?？截悢?shù)越多，細菌分裂時出現(xiàn)無質(zhì)粒子代細菌的概率就越低，質(zhì)粒就越穩(wěn)定。