中國微生物菌種查詢網(wǎng) 盡管臨床微生物實(shí)驗(yàn)室因新技術(shù)的不斷出現(xiàn)而發(fā)生巨大變化，但作為傳統(tǒng)技術(shù)的革蘭染色仍處于舉足輕重的地位，它可先于培養(yǎng)結(jié)果、迅速地為臨床醫(yī)生提供潛在病原菌信息，而指導(dǎo)經(jīng)驗(yàn)治療。而錯誤的革蘭染色結(jié)果會誤導(dǎo)臨床醫(yī)生。
革蘭氏染色依賴手工操作，并且，結(jié)果解釋主要依靠檢驗(yàn)醫(yī)師的主觀判斷，錯誤的發(fā)生不可避免。Linoj P. Samuel 學(xué)者等從美國四大三級醫(yī)療中心的微生物實(shí)驗(yàn)室收集數(shù)據(jù)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)則評估所有非血標(biāo)本的錯誤率，目的是建立一個(gè)可接受的革蘭染色標(biāo)準(zhǔn)檢查程序并找出關(guān)鍵改進(jìn)點(diǎn)。
研究方法：
每個(gè)實(shí)驗(yàn)室篩選出 976 到 1864 個(gè)非血標(biāo)本的涂片 / 培養(yǎng)結(jié)果，共 6115 個(gè)標(biāo)本，包括呼吸道液體、活檢組織、膿液等，這類標(biāo)本革蘭染色為常規(guī)培養(yǎng)工作的一部分。
研究者判定染色和培養(yǎng)結(jié)果是否矛盾，需依據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)：（1）培養(yǎng)檢出適中或大量某一種細(xì)菌，而涂片未找到相應(yīng)染色 / 形態(tài)特征的細(xì)菌；（2）涂片找到適中或大量細(xì)菌，但相應(yīng)菌的培養(yǎng)結(jié)果為陰性。除涂片固定方式不同外，四個(gè)實(shí)驗(yàn)室革蘭染色操作并無很大差異。
研究發(fā)現(xiàn)了什么？
染色和培養(yǎng)結(jié)果不一致的樣本的比例高達(dá) 5%（303/6115），303 份不一致樣本中，263 份樣本可以再找出供本研究做深入分析，其余 40 例樣本不可得，因此不納入計(jì)算。
1. 在 263 份不一致樣本中，涂片（-）/ 培養(yǎng)（+）類型占 58%（153/263）, 涂片 （+）/ 培養(yǎng) （-） 占 42%（111/263）。111 例標(biāo)本中 87 例理論上應(yīng)該同時(shí)做厭氧培養(yǎng)，實(shí)際上只有 38 例（44%）做了厭氧培養(yǎng)，但厭氧培養(yǎng)并未培養(yǎng)出任何細(xì)菌，可能是厭氧標(biāo)本的收集、轉(zhuǎn)運(yùn)和培養(yǎng)過程造成微生物死亡。
2. 在 263 個(gè)不一致的標(biāo)本中，涂片報(bào)告錯誤的標(biāo)本占 24%（62/263），涂片報(bào)告錯誤的定義為：涂片最初報(bào)告為陽性，但涂片復(fù)審并未發(fā)現(xiàn)任何微生物；或最初報(bào)告為陰性，但涂片復(fù)審在 3 個(gè)以上視野找到了微生物。同時(shí)，作者發(fā)現(xiàn)，不同實(shí)驗(yàn)室間錯誤率的差異顯著，比例在 9%~45% 之間，平均錯誤發(fā)生率為 1.2%，但實(shí)驗(yàn)室間差異差異也是顯著的，為 0.4%~2.7%。
2. 涂片報(bào)告錯誤的標(biāo)本中，被報(bào)告“假陰性”結(jié)果的樣本占 81%（50/62），即有一種或多種細(xì)菌未被檢出，最常漏檢的細(xì)菌是 G+ 球菌（28 例）和 G- 桿菌 / 球桿菌（19 例），其次是是真菌（8 例）和 G+ 桿菌（5 例）。
3. 涂片報(bào)告錯誤的標(biāo)本中，被報(bào)告“假陰性”結(jié)果的樣本占 19%（12/62），1 例為 G+ 桿菌，2 例為 G- 桿菌 / 球桿菌，其余 9 例系被口腔正常菌群污染的呼吸道標(biāo)本造成，據(jù)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)，這些標(biāo)本本該被拒收。
該研究給我們什么樣的啟示？
盡管革蘭氏染色已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室中開展一個(gè)多世紀(jì)了，但由于該方法操作復(fù)雜多樣，讀片的主觀性強(qiáng)，因此，即使到現(xiàn)在，即使在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)高度發(fā)達(dá)的美國高等級醫(yī)院，也依舊存在相當(dāng)數(shù)量的錯誤率。隨著健康醫(yī)療日趨透明，減少醫(yī)療錯誤造成的潛在危害已成為主要關(guān)注點(diǎn)。如果我們不首先搞清楚醫(yī)療錯誤發(fā)生情況，實(shí)驗(yàn)室永遠(yuǎn)不知道該從何處進(jìn)行改進(jìn)。對于微生物實(shí)驗(yàn)室而言，監(jiān)控革蘭染色錯誤率是至關(guān)重要的第一步。