細(xì)胞凍存
1. 配置凍存培養(yǎng)基，與2℃-8℃下儲(chǔ)存，直至使用；注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系；
2. 凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代（詳細(xì)步驟參考細(xì)胞傳代）時(shí)所用方法輕柔的使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)；用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞；根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量；
3. 以約200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心3-5分鐘；在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀；
4. 用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度；
5. 將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中；分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)；
6. 使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約減低1℃；或?qū)⒀b有細(xì)胞的凍存管放入Nalgeng細(xì)胞凍存盒中，然后將凍存盒置于-80℃條件下過夜；
7. 將已經(jīng)冷凍的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到液氮罐中儲(chǔ)存。
8. 沒有上述條件的實(shí)驗(yàn)室，亦可按下列順序依次降溫；室溫→4℃ 30min→20℃ 30-60min→80℃過夜→液氮保存。