營(yíng)養(yǎng)瓊脂（Nutrient Agar）的原理與使用方法及應(yīng)用！
小楊 / 2025-05-29 09:35:30
營(yíng)養(yǎng)瓊脂是一種基礎(chǔ)微生物培養(yǎng)基，廣泛用于非苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)、菌落計(jì)數(shù)或保存菌種。以下是其原理及使用方法的詳細(xì)說明：
一、原理
營(yíng)養(yǎng)瓊脂通過提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng)成分和環(huán)境條件支持微生物增殖，主要成分及作用如下：
蛋白胨：提供氮源、氨基酸和短肽鏈。
牛肉浸粉/酵母提取物：補(bǔ)充碳源、維生素（如B族）和微量元素。
氯化鈉（NaCl）：維持滲透壓平衡，模擬細(xì)菌生長(zhǎng)的生理環(huán)境。
瓊脂（約1.5%）：作為凝固劑，形成固體培養(yǎng)基便于菌落觀察。
適用對(duì)象：
大腸桿菌、
金黃色葡萄球菌等普通細(xì)菌，不適用于苛養(yǎng)菌（如
嗜血桿菌）或?qū)Ｐ詤捬蹙?/div>
二、使用方法
1、培養(yǎng)基配制
配方（以1L為例）：
蛋白胨：5g
牛肉浸粉：3g
NaCl：5g
瓊脂：15g
蒸餾水：1000mL
步驟：
a.稱取各成分，加入蒸餾水中攪拌溶解。
b.加熱煮沸至瓊脂完全融化（避免焦糊）。
c.高壓滅菌：121℃、15-20分鐘。
d.冷卻至約50℃后傾注無菌平皿或分裝試管（制備斜面）。
2、接種與培養(yǎng)
接種方法：劃線法、涂布法或穿刺法（依實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇）。
培養(yǎng)條件：35-37℃恒溫培養(yǎng)18-24小時(shí)，觀察菌落形態(tài)。
3、結(jié)果判讀
陽性：培養(yǎng)基表面出現(xiàn)菌落（可能為圓形、濕潤(rùn)、顏色各異）。
陰性：無菌落生長(zhǎng)（可能因樣本無微生物或培養(yǎng)條件不當(dāng)）。
三、注意事項(xiàng)
滅菌控制：避免高溫長(zhǎng)時(shí)間滅菌，以防碳源焦化。
無菌操作：傾倒培養(yǎng)基需在超凈臺(tái)中進(jìn)行，避免污染。
儲(chǔ)存：滅菌后未使用的培養(yǎng)基可冷藏保存1-2周，凝固后避免反復(fù)融化。
局限性：苛養(yǎng)菌、真菌或病毒需使用專用培養(yǎng)基。
四、應(yīng)用場(chǎng)景
臨床標(biāo)本（如痰液、尿液）的初步細(xì)菌培養(yǎng)。
食品、環(huán)境樣本的衛(wèi)生檢測(cè)（如菌落總數(shù)測(cè)定）。
實(shí)驗(yàn)室菌種傳代保藏。
通過以上步驟，
營(yíng)養(yǎng)瓊脂可高效支持常規(guī)微生物的分離與培養(yǎng)。若需特殊菌種篩選，建議選擇選擇性或鑒別性培養(yǎng)基。
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