膽鹽葡萄糖肉湯的使用方法與適用場景及注意事項(xiàng)有哪些?
小楊 / 2025-05-28 09:31:55
膽鹽葡萄糖肉湯(Bile Salt Glucose Broth)是一種選擇性液體培養(yǎng)基,主要用于腸道致病菌(如
沙門氏菌、
志賀氏菌等)的增菌培養(yǎng),同時(shí)抑制部分非致病菌的生長。以下是其原理及使用方法的詳細(xì)說明:
一、原理
1、選擇性抑制
膽鹽:作為選擇性抑制劑,可抑制革蘭氏陽性菌(如
葡萄球菌、
鏈球菌)及部分非致病性腸道革蘭氏陰性菌(如
大腸桿菌)的生長,但對(duì)
沙門氏菌、
志賀氏菌等致病菌的抑制較弱,從而實(shí)現(xiàn)選擇性增菌。
2、營養(yǎng)支持
葡萄糖:作為主要碳源,支持目標(biāo)菌(如
沙門氏菌)的生長代謝。目標(biāo)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸,導(dǎo)致培養(yǎng)基pH下降。
3、酸堿指示劑
通常添加溴甲酚紫(pH指示劑),初始顏色為紫色。當(dāng)目標(biāo)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸時(shí),培養(yǎng)基變黃;若細(xì)菌不發(fā)酵葡萄糖,顏色保持紫色或變?yōu)樯钭仙承┚纸獾鞍踪|(zhì)產(chǎn)堿)。
二、使用方法
1、樣本處理
臨床樣本:如糞便、直腸拭子等,可直接接種或經(jīng)預(yù)增菌后接種。
食品/環(huán)境樣本:需均質(zhì)化后取適量接種。
2、接種與培養(yǎng)
將樣本接種于膽鹽葡萄糖肉湯中,混勻。
培養(yǎng)條件:
溫度:35–37℃(常規(guī)培養(yǎng))或42℃(用于
沙門氏菌選擇性增菌)。
時(shí)間:18–24小時(shí),部分需延長至48小時(shí)。
環(huán)境:需氧或微需氧條件(根據(jù)目標(biāo)菌調(diào)整)。
3、結(jié)果觀察
顏色變化:
變黃:葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)酸(可能為目標(biāo)菌,如
沙門氏菌)。
紫色或深紫色:未發(fā)酵葡萄糖(可能為其他菌或非目標(biāo)菌)。
渾濁度:液體渾濁提示細(xì)菌生長。
4、后續(xù)鑒定
挑取培養(yǎng)物進(jìn)行革蘭氏染色、生化試驗(yàn)或血清學(xué)鑒定,確認(rèn)目標(biāo)菌。
三、注意事項(xiàng)
1、選擇性局限:
部分
大腸桿菌或其他非致病菌可能耐受膽鹽,需結(jié)合其他生化試驗(yàn)排除。
2、假陽性/假陰性:
某些非目標(biāo)菌可能產(chǎn)酸(假陽性),需結(jié)合培養(yǎng)特性綜合判斷。
部分沙門氏菌(如
傷寒沙門氏菌)發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸但產(chǎn)氣少,需延長培養(yǎng)時(shí)間。
3、質(zhì)量控制:
4、儲(chǔ)存條件:
干粉培養(yǎng)基避光干燥保存,配制后液體培養(yǎng)基需冷藏(2–8℃),1周內(nèi)使用。
四、適用場景
食品檢測:食品中
沙門氏菌污染的增菌培養(yǎng)。
環(huán)境監(jiān)測:水體或表面樣本的腸道致病菌檢測。
通過
膽鹽葡萄糖肉湯的選擇性增菌,可提高目標(biāo)菌的檢出率,為后續(xù)分離鑒定提供基礎(chǔ)。實(shí)際應(yīng)用中需結(jié)合具體實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜆颖绢愋蛢?yōu)化操作流程。
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