革蘭陽性球菌是根據(jù)對細(xì)菌進(jìn)行革蘭氏染色的結(jié)果來區(qū)分的,如果將細(xì)菌作革蘭氏染色,凡染后菌體呈紫色的,稱“革蘭氏陽性菌”,菌體呈伊紅色,稱“革蘭氏陰性菌” 。無論陽性菌還是陰性菌都有桿菌和球菌。葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌是臨床最為常見的病原菌,葡萄球菌屬于革蘭陽性球菌,大腸桿菌屬于革蘭陰性菌中的腸桿菌科。 ATCC菌種
革蘭陽性球菌菌落特征
(1)溶血: 血平板上的溶血有助于一些細(xì)菌的初步鑒定,如金黃色葡萄球菌、鏈球菌屬等。
α 溶血: α溶血使菌落周圍的血液部分溶解,其結(jié)果是菌落周圍有一個(gè)草綠色的環(huán),疑似肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌。
?溶血: ? 溶血菌落周圍的血液完全溶血,是由于紅細(xì)胞完全被溶解所致,如A 群?溶血鏈球菌(化膿性鏈球菌)產(chǎn)生寬闊清晰的溶血環(huán);B群?溶血鏈球菌(無乳鏈球菌)和產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌產(chǎn)生一個(gè)狹窄的分散溶血環(huán)。
(2) 衛(wèi)星現(xiàn)象: 乏養(yǎng)菌屬、Granulicatella elegans
2 . 鏡下形態(tài)
(1)革蘭陽性球形、葡萄狀、單個(gè)、成雙的疑似葡萄球菌屬。
(2) 革蘭陽性球狀、球桿狀、鏈狀(短鏈)排列、鏈的長短不一(液體培養(yǎng)基中為長鏈,固體培養(yǎng)基中為短鏈,短鏈由4~8 個(gè)細(xì)菌組成、長鏈可達(dá)20~30 個(gè))的疑似鏈球菌屬。
(3) 革蘭陽性矛頭狀、成雙或短鏈排列的疑似肺炎鏈球菌。
(4) 革蘭陽性球桿狀、成雙、鏈狀的疑似乳球菌屬、明串珠球菌屬、格魯比卡菌屬等。
(5) 革蘭陽性球狀、球桿狀的疑似乏養(yǎng)菌屬等。
(6) 革蘭陽性球狀、成雙、鏈狀、成簇的疑似氣球菌屬、孿生球菌屬、創(chuàng)傷球菌屬、片球菌屬等。
(7)革蘭陽性球桿狀、成雙、四聯(lián)狀的疑似差異球菌屬等。
(8) 革蘭陽性球狀、成雙、成簇的疑似口腔球菌屬等。
(9) 革蘭陽性球狀、成簇、四聯(lián)狀的疑似微球菌屬等。
注: 溶血孿生球菌扁平的側(cè)面相鄰,常是雙球狀。
革蘭陽性球菌的基本特征
在血瓊脂平板上生長,但在麥康凱、伊紅亞甲藍(lán)、中國藍(lán)瓊脂平板上不生長,提示為革蘭陽性球菌。但有些非發(fā)酵菌(如:艾肯菌屬、金氏桿菌屬、心桿菌屬等)在麥康凱平板上也不生長。
革蘭陽性球菌的基本鑒定試驗(yàn)要求
觸酶試驗(yàn)是鑒定革蘭陽性球菌的重要試驗(yàn)(任何革蘭陽性球菌必須先做觸酶試驗(yàn)) ,此試驗(yàn)不宜碰到血瓊脂,因?yàn)榧t細(xì)胞內(nèi)含有過氧化物酶,操作過程中若沾染紅細(xì)胞可造成假陽性。
凝固酶試驗(yàn)是鑒定葡萄球菌的重要試驗(yàn),此試驗(yàn)有玻片法和試管法。須注意以下幾點(diǎn)。
(1 ) 有些葡萄球菌(昂和葡萄球菌、施氏葡萄球菌)凝固酶試驗(yàn)玻片法陽性,試管法驗(yàn)證陰性,因其產(chǎn)生聚集因子。有些金黃色葡萄球菌玻片法陰性,試管法陽性,因該金黃色葡萄球菌無結(jié)合凝固酶,有游離凝固酶。
(2) 試驗(yàn)可使用EDTA 抗凝的兔血漿,不能使用枸櫞酸鹽抗凝,因?yàn)橛行┘?xì)菌可分解枸櫞酸鹽,可出現(xiàn)假陽性。
(3)高鹽甘露醇瓊脂平板上的菌落不能用于凝固酶試驗(yàn),因高鹽可致菌體自凝。