原代細胞和傳代細胞的區(qū)別是什么？具體差異有哪些？
小楊 / 2025-12-04 09:34:46
百歐博偉生物：原代細胞和傳代細胞的核心區(qū)別在于細胞來源、生物學特性、培養(yǎng)特性及應(yīng)用場景等維度，二者是細胞培養(yǎng)領(lǐng)域中最基礎(chǔ)且關(guān)鍵的兩類細胞，具體差異如下：
一、核心定義與來源
原代細胞：直接從活體組織（如大鼠支氣管、人外周血、小鼠肝臟等）中分離、純化得到的細胞，未經(jīng)過傳代擴增，保留了組織來源的原始生物學特征。
例：你此前關(guān)注的大鼠原代支氣管上皮細胞，就是直接從大鼠支氣管組織中解離、篩選獲得的初代細胞。
傳代細胞：原代細胞經(jīng)首次消化、離心、重懸并接種到新培養(yǎng)器皿的操作后，即為第 1 代傳代細胞；后續(xù)每一次消化、接種的操作均稱為“傳代”，多次傳代后的細胞統(tǒng)稱傳代細胞（也常說“細胞系”，若能無限傳代則為永生化細胞系）。
二、生物學特性
維度 原代細胞 傳代細胞
細胞表型/基因型 高度接近體內(nèi)原組織細胞，基因型、表型穩(wěn)定，無明顯變異 傳代次數(shù)越多，越易發(fā)生基因型/表型改變；永生化細胞系多存在基因修飾或自發(fā)突變
功能特性 保留原始組織的生理功能（如支氣管上皮細胞的炎性介質(zhì)分泌功能） 功能逐步喪失或改變，僅部分傳代早期細胞保留部分原始功能
異質(zhì)性 細胞群體異質(zhì)性高（包含組織中多種亞型細胞） 經(jīng)多次傳代后，優(yōu)勢細胞株逐漸富集，異質(zhì)性降低
增殖能力 增殖能力有限，屬于有限細胞系 傳代早期增殖能力較強，永生化細胞系可無限增殖
三、培養(yǎng)特性
原代細胞：
培養(yǎng)難度高：對培養(yǎng)基、培養(yǎng)環(huán)境（如包被、溫度、CO?濃度）要求苛刻，貼壁依賴型原代細胞（如
上皮細胞）常需膠原/纖連蛋白包被器皿；
貼壁/生長速度慢：如原代支氣管上皮細胞需 12-18 小時才開始貼壁，且易受污染；
傳代次數(shù)極少：多數(shù)原代細胞僅能傳 2-5 代，之后會進入衰老、凋亡階段。
傳代細胞：
培養(yǎng)難度低：對培養(yǎng)基要求相對寬松，無需特殊包被（部分除外）；
貼壁/生長速度快：傳代后快速貼壁并進入對數(shù)生長期；
傳代次數(shù)：普通傳代細胞可傳 5-20 代，永生化細胞系可無限傳代。
四、應(yīng)用場景
原代細胞：
適用于要求貼近體內(nèi)生理狀態(tài)的研究，如：呼吸道疾病發(fā)病機制研究（模擬體內(nèi)支氣管上皮細胞的功能）、藥物毒理學評價、細胞功能驗證、臨床樣本檢測等；缺點是制備周期長、成本高，且不同批次細胞差異較大。
傳代細胞：
適用于大規(guī)模實驗、重復(fù)性驗證、基礎(chǔ)機制研究、疫苗生產(chǎn)、基因編輯等；優(yōu)勢是細胞均一性好、易擴增、成本低，缺點是無法完全模擬體內(nèi)真實狀態(tài)，結(jié)果外推至體內(nèi)時需謹慎。
五、總結(jié)
原代細胞的核心優(yōu)勢是“貼近體內(nèi)真實狀態(tài)”，但培養(yǎng)和使用成本高、穩(wěn)定性差；傳代細胞的核心優(yōu)勢是“易培養(yǎng)、可重復(fù)”，但生物學特性與體內(nèi)原細胞存在偏差。選擇時需根據(jù)研究目的判斷：若需模擬體內(nèi)生理/病理過程，優(yōu)先用原代細胞；若需大規(guī)模、高通量實驗，傳代細胞更合適。
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