單料腸球菌肉湯培養(yǎng)基的培養(yǎng)現(xiàn)象與使用方法及驗證試驗！
小楊 / 2025-05-15 09:02:49
單料腸球菌肉湯培養(yǎng)基（Single Strength Enterococcus Broth）是一種選擇性液體培養(yǎng)基，主要用于腸球菌的增菌培養(yǎng)和檢測。以下是其使用方法和典型現(xiàn)象的詳細說明：
一、使用方法
1、樣本處理
采集水樣、食品樣本或臨床標本（如尿液、糞便等），按標準方法進行預(yù)處理（如稀釋、過濾或均質(zhì)化）。
2、接種
無菌操作下，將1-10 mL待檢樣本直接接種到單料腸球菌肉湯管中。
若樣本含雜菌較多（如糞便），可先稀釋后接種，減少背景干擾。
3、培養(yǎng)條件
溫度：35-37℃恒溫培養(yǎng)。
時間：24-48小時（部分生長緩慢的
腸球菌需延長至48小時觀察結(jié)果）。
4、結(jié)果觀察
觀察培養(yǎng)基的渾濁度、顏色變化及是否產(chǎn)氣。
二、培養(yǎng)現(xiàn)象解析
1、陽性結(jié)果
渾濁度：明顯渾濁，表明細菌增殖。
顏色變化：若含pH指示劑，產(chǎn)酸會使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。
產(chǎn)氣：部分腸球菌可能分解糖類產(chǎn)氣，可見小氣泡（需倒置 Durham 管觀察）。
2、陰性結(jié)果
培養(yǎng)基保持澄清，顏色無變化，無氣泡產(chǎn)生。
三、驗證試驗（關(guān)鍵步驟）
1、轉(zhuǎn)種確認
挑取陽性培養(yǎng)物接種到選擇性固體培養(yǎng)基，觀察典型菌落（如紅色或粉紅色菌落）。
2、革蘭染色與鏡檢
腸球菌為革蘭陽性球菌，成對或短鏈狀排列。
3、生化鑒定
膽汁七葉苷試驗：陽性（水解七葉苷變黑）。
PYR試驗：陽性（水解吡咯烷酮-β-萘胺顯紅色）。
四、注意事項
選擇性成分：培養(yǎng)基中含疊氮化鈉（抑制革蘭陰性菌）和膽鹽（抑制非腸球菌的革蘭陽性菌），但對部分腸球菌可能有輕微抑制，需嚴格按推薦培養(yǎng)時間操作。
假陽性/陰性：某些鏈球菌可能生長，需生化試驗確認；樣本過度稀釋或抑制劑過量可能導(dǎo)致假陰性。
生物安全：操作潛在致病菌時需遵守生物安全規(guī)范，廢棄物滅菌處理。
五、應(yīng)用場景
水質(zhì)檢測：用于評估水中糞源性污染。
食品衛(wèi)生：檢測食品中腸球菌污染（指示衛(wèi)生狀況）。
臨床診斷：輔助鑒定尿路感染或敗血癥中的腸球菌。
通過以上步驟和現(xiàn)象分析，可有效利用單料腸球菌肉湯進行目標菌的篩查與鑒定。若需進一步精準鑒定，建議結(jié)合分子生物學(xué)方法或質(zhì)譜分析。
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