微生物學的基礎性工作:微生物的分類和鑒定!
小楊 / 2024-03-12 08:53:07
百歐博偉生物:微生物的分類和鑒定是微生物學的基礎性工作。微生物分類是在對大量單個微生物進行觀察、分析和描述的基礎上,以它們的形態(tài)、結構、生理生化反應和遺傳性等特征的異同為依據,并根據生物進化的規(guī)律和應用方便,將微生物分門別類地排列成一個系統(tǒng)。目前微生物分類鑒定方法分為以下幾個方面。
1、形態(tài)特征
①個體特征,包括在顯微鏡下的細胞大小、形狀、排列、運動性、鞭毛著生部位和數目、芽孢有無、部位和形狀、有無莢膜,放線菌和真菌繁殖器官的形狀、構造、孢子數目、形狀、大小、顏色和表面特征等。
②群體特征即培養(yǎng)特征,菌落是菌株在一定的培養(yǎng)基中的群體特征。包括固體培養(yǎng)基上菌落的形狀、大小、顏色、光澤、黏稠度、隆起情況、透明度及邊緣特征,是否分泌水溶性色素、質地、移動性和氣味;半固體培養(yǎng)基上穿刺接種后的生長及運動情況;液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)液混濁程度,表面有無菌膜,有無沉淀及其沉淀的形態(tài),有無氣泡產生,培養(yǎng)液的色澤變化等。
2、生理和生化特征
①營養(yǎng)來源 可以試驗多種糖能否被微生物作為碳源和能源利用,以及微生物對特定有機化合物和CO2的利用能力。對于氮源,看其是利用蛋白質、蛋白胨、氨基酸或銨鹽、硝酸鹽中的氮,還是大氣中的游離氮。
②代謝產物 例如在培養(yǎng)基中檢測微生物有否形成有機酸、有否產生氣體,能否分解色氨酸產生吲哚,能否使硝酸鹽還原硝酸鹽或氮,能否產生色素或抗生素等。
③與溫度和氧氣的關系 有嗜熱菌,嗜冷菌,嗜溫菌之分,也有好氧菌,厭氧菌和兼性好氧菌之分。
3、血清反應
將已知菌種、型或菌株制成抗血清,根據它是否與待鑒定對象發(fā)生特異性血清反應鑒別未知菌。此反應也用于病毒分類,尤其是噬菌體分類。
4、生態(tài)特性
微生物與其他生物的寄生或共生,細菌的致病性,微生物在自然界中是否耐高滲、是否嗜鹽性等。
5、生活史
親代個體經一系列生長、發(fā)育階段而產生子一代個體的全部經歷,就稱為該生物的生活史或生命周期。微生物個體發(fā)育的階段變化也是分類鑒別的重要依據。
6、對噬菌體的敏感性
與血清反應類似,各噬菌體有嚴格的寄生范圍,可以根據菌體對噬菌體的敏感性進行區(qū)分。
7、核酸分析
DNA是遺傳物質的攜帶者,決定生物的表型。遺傳信息在DNA中的存在形式表現(xiàn)為DNA的堿基數目及其排列順序。親緣關系越遠的種,其堿基數目和排列順序相差越大。
8、DNA雜交試驗
進一步判斷微生物間的親緣關系,須比較DNA的堿基序列,最簡便的方法是DNA雜交。其基本原理是DNA解鏈的可逆性和堿基配對的專一性。提取DNA并使之解鏈,再使互補的堿基重新配對結合成雙鏈。根據能生成雙鏈的情況,可測知雜合率。雜合率越高,表示兩個DNA之間堿基順序的相似越高,親緣關系也就越近。
9、細胞壁成分分析
不同微生物的細胞壁,在其組成單位的物質基礎或在結構方面有許多明顯的特殊性。比如,霉菌的細胞壁主要含有幾丁質;而細菌細胞壁的主要成分是肽聚糖。革蘭陰性菌細胞壁的肽聚糖含量較低,另外還有多肽、脂蛋白及脂多糖等;革蘭陽性菌細胞壁肽聚糖的比例則較高,另外有蛋白質、多糖、磷壁酸和磷璧質等。
10、紅外光譜
一般認為每種物質的化學結構都具有特定的紅外光譜。若兩個樣品紅外吸收光譜完全相同,可以初步認為它們是同一種物質。所以,利用紅外光譜技術測定微生物的化學成分,也能用于微生物分類,簡單快速,樣品用量少。
11、數值分類法
又稱統(tǒng)計分類法。根據“等重要原則”,不分主次,以分析多數特征為基礎,進行菌株間兩兩比較,通過計算菌株間的總相似值來分群歸類,數據處理量較大,需借助于計算機實現(xiàn)。
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