含瓊脂培養(yǎng)基水浴及復溶的總體原則與檢查要求有哪些？
小楊 / 2026-02-09 09:18:30
一、總體原則
防止過熱滅菌、局部焦糊、瓊脂降解、產生氣泡
保證傾注時溫度穩(wěn)定、無菌、流動性好
二、培養(yǎng)基熔化（復溶）要求
1、已滅菌、凝固的瓊脂培養(yǎng)基（瓶裝/試管/三角瓶）
必須采用沸水浴或流通蒸汽緩慢熔化，不可直接電爐/明火干燒。
熔化過程中間歇輕輕搖勻，使受熱均勻，防止瓶底焦化、瓊脂水解。
2、完全熔化標準
培養(yǎng)基呈透明、無顆粒、無凝塊，無分層、無沉淀。
未完全熔化不得使用，否則平板厚薄不均、菌落生長異常。
3、避免反復熔化
已熔化又凝固的培養(yǎng)基禁止多次反復加熱熔化，會破壞營養(yǎng)、降低硬度、影響檢出率。
三、水浴保溫（關鍵溫度：46±1℃）
1、熔化后立即放入恒溫水浴
溫度嚴格控制：46±1℃
目的：
不燙死微生物（＞50℃易致死）
不提前凝固（＜44℃易局部凝固）
2、保溫時間
盡量短時間保溫，一般不超過 3h。
長時間保溫會導致：營養(yǎng)破壞、pH 偏移、瓊脂強度下降、易污染。
3、水浴操作要求
水浴液面應高于培養(yǎng)基液面，保證溫度均勻。
防止水進入瓶口/試管口造成污染。
使用前輕輕混勻，避免底部溫度偏高。
四、傾注前檢查要求
培養(yǎng)基內無氣泡、無裂紋、無渾濁、無雜菌生長。
溫度手感：握在手中溫熱不燙（約 46℃）。
空白對照合格，方可用于樣品接種。
五、考試/簡答題極簡標準答案
含瓊脂培養(yǎng)基應采用沸水浴或流通蒸汽緩慢熔化，嚴禁直接干燒，防止焦化與營養(yǎng)破壞。
熔化后立即置于46±1℃恒溫水浴中保溫，避免溫度過高殺死細菌或過低提前凝固。
保溫時間不宜過長，一般不超過 3 小時，不可反復熔化。
水浴液面應高于培養(yǎng)基液面，使用前輕搖混勻，保證溫度均勻、無凝塊、無氣泡。
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