微生物肥料實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基技術(shù)條件的具體內(nèi)容是什么？
小楊 / 2025-09-29 09:36:39
百歐博偉生物：微生物肥料實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基技術(shù)條件主要依據(jù) NY/T 1114-2006《微生物肥料實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基技術(shù)條件》標(biāo)準(zhǔn)，具體內(nèi)容如下：
一、范圍
規(guī)定了微生物肥料實(shí)驗(yàn)室使用的培養(yǎng)基技術(shù)要求，適用于微生物肥料產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)、菌種培養(yǎng)與保藏用培養(yǎng)基的制備。
二、培養(yǎng)基選用原則
含有滿足所培養(yǎng)微生物生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比例和濃度合適。
有合適的 pH 范圍和一定的緩沖 pH 能力，以及一定的氧化還原電位和合適的滲透壓。
對(duì)于特殊用途的培養(yǎng)基，如選擇培養(yǎng)基應(yīng)加入利于目的微生物生長(zhǎng)而抑制其他微生物生長(zhǎng)的化學(xué)物質(zhì)；菌種保藏培養(yǎng)基則根據(jù)不同微生物特性有不同要求，如產(chǎn)芽孢或孢子的菌種保藏培養(yǎng)基應(yīng)以易產(chǎn)生芽孢或孢子為原則等。
三、要求
1、材料
用于配制培養(yǎng)基的化學(xué)試劑純度至少為化學(xué)純；試劑出現(xiàn)顏色改變、沉淀、混濁、吸潮結(jié)塊等現(xiàn)象時(shí)不宜使用；天然原材料應(yīng)質(zhì)量穩(wěn)定，未發(fā)生霉變、生蟲(chóng)和變質(zhì)；瓊脂凝固后應(yīng)具有良好的透明度。
2、器皿
配制試劑所用的器皿應(yīng)潔凈；盛裝培養(yǎng)基的器皿應(yīng)由對(duì)微生物無(wú)毒害并耐高溫的材料制成；材料需加熱溶解時(shí)，可選用玻璃容器、搪瓷缸和不銹鋼容器等，禁用銅制、鋁制和鐵制容器。
3、棉塞或硅膠塞
不應(yīng)使用脫脂棉制作棉塞；使用棉塞或硅膠塞時(shí)，將其長(zhǎng)度的 2/3 塞入容器內(nèi)，要求松緊適當(dāng)，緊貼管壁；滅菌時(shí)，棉塞外要加包牛皮紙或耐高溫透氣塑料薄膜，以防止滅菌時(shí)棉塞受潮或進(jìn)水。
4、培養(yǎng)基配制
材料稱(chēng)量：根據(jù)培養(yǎng)基配方，準(zhǔn)確稱(chēng)取相應(yīng)材料的量；當(dāng)配方中某種成分微量時(shí)，可預(yù)先將該成分配制成一定濃度的母液，然后按量加入，母液應(yīng)低溫保存。
材料溶解：不溶于水的組分應(yīng)在所需的溶劑中溶解后，再加入到培養(yǎng)基中；非溶性組分應(yīng)最后加入；易形成沉淀的組分應(yīng)分別溶解；不易溶解的組分應(yīng)做預(yù)處理，加熱溶解過(guò)程中一旦出現(xiàn)焦化現(xiàn)象時(shí)應(yīng)棄用；培養(yǎng)基中含有指示劑或有顏色的試劑時(shí)，應(yīng)在培養(yǎng)基 pH 調(diào)節(jié)好之后再加入。
pH 測(cè)定與調(diào)節(jié)：用精密 pH 試紙或酸度計(jì)測(cè)定培養(yǎng)基的 pH，培養(yǎng)基的 pH 用稀酸或稀堿溶液調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)過(guò)程中不可用酸堿溶液反復(fù)調(diào)節(jié)。
分裝：裝入三角瓶的培養(yǎng)基體積不應(yīng)超過(guò)其容量的 1/2，裝入試管的培養(yǎng)基體積為其容量的 1/5-1/4，分裝過(guò)程中防止培養(yǎng)基粘附在瓶口或管口。
滅菌：高壓蒸汽滅菌控制的條件為 121℃、維持 30min，當(dāng)培養(yǎng)基中含有不耐高溫的組分時(shí)，可采用 115℃、維持 15min-30min；過(guò)濾除菌是在無(wú)菌條件下，將待除菌溶液經(jīng)濾膜為 φ≤0.2μm 的細(xì)菌過(guò)濾器，適用于易受高溫破壞、失活的物質(zhì)的滅菌，如維生素；干熱滅菌是將待滅菌的器皿，用紙包好或放在特定的容器內(nèi)，置于烘箱中，在 160℃左右保持 2h，適用于培養(yǎng)皿等玻璃器皿的滅菌。
平板和斜面的制備：在無(wú)菌條件下把冷卻至 45℃左右的培養(yǎng)基倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi)，平板厚度控制在 3mm-5mm，制備的斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管長(zhǎng)度的 2/5。
5、培養(yǎng)基合格檢驗(yàn)
檢查固體培養(yǎng)基濕度，培養(yǎng)基冷凝水過(guò)多或干燥出現(xiàn)裂痕時(shí)，均不能使用；隨機(jī)抽取已滅過(guò)菌的培養(yǎng)基放入 28℃-30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h-48h，確定無(wú)菌生長(zhǎng)后方可使用。
6、培養(yǎng)基存放
培養(yǎng)基應(yīng)置于冰箱 4℃-8℃保存，經(jīng)過(guò)存放的培養(yǎng)基使用前應(yīng)進(jìn)行合格檢驗(yàn)，合格后方可使用。
四、微生物肥料常用培養(yǎng)基配方、配制要點(diǎn)和用途
標(biāo)準(zhǔn)中附錄 A 列出了營(yíng)養(yǎng)瓊脂、芽孢桿菌培養(yǎng)基、根瘤菌培養(yǎng)基等常用培養(yǎng)基的配方、配制要點(diǎn)和用途，例如營(yíng)養(yǎng)瓊脂適用于一般細(xì)菌培養(yǎng)和保藏，芽孢桿菌培養(yǎng)基適用于芽孢桿菌的保藏等。
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