微生物實(shí)驗(yàn)室常用消毒和滅菌方法的分類與選擇原則及應(yīng)用！
小楊 / 2025-09-17 11:13:27
百歐博偉生物：消毒和滅菌是微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)等領(lǐng)域控制微生物污染的核心技術(shù)，兩者的區(qū)別在于：消毒是殺滅或清除物體表面的病原微生物（不要求完全殺滅芽孢等抵抗力極強(qiáng)的微生物），而滅菌是徹底殺滅所有微生物（包括細(xì)菌芽孢、真菌孢子等）。以下是常用的消毒和滅菌方法分類及應(yīng)用：
一、物理消毒/滅菌法
利用物理因素（如熱力、輻射、過濾等）殺滅微生物，是最常用且高效的方法。
1、熱力滅菌法（最經(jīng)典，適用于耐高溫、耐濕物品）
原理：通過高溫破壞微生物的蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子，導(dǎo)致其死亡。
（1）干熱滅菌
適用范圍：耐高溫、怕濕或需干燥的物品（如玻璃器皿、金屬工具、粉末狀物質(zhì)）。
常用方法：
干熱滅菌箱：160~170℃維持 2~3h（180℃需 30min），通過空氣傳導(dǎo)熱量，適用于玻璃試管、載玻片、接種環(huán)等。
火焰灼燒：直接用酒精燈火焰灼燒至紅熱（如接種環(huán)、鑷子尖端），瞬間滅菌，用于金屬工具的快速滅菌。
（2）濕熱滅菌
特點(diǎn)：蒸汽穿透力強(qiáng)，滅菌效率高于干熱（相同溫度下，濕熱更易破壞蛋白質(zhì)）。
常用方法：
高壓蒸汽滅菌：實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)療中最常用，適用于培養(yǎng)基、玻璃器皿、手術(shù)器械等。參數(shù)：121℃（103.4kPa）維持 20~30min，可殺滅包括芽孢在內(nèi)的所有微生物。
煮沸消毒：100℃煮沸 5~10min，可殺滅細(xì)菌繁殖體，但無法殺滅芽孢，適用于餐具、注射器等的初步消毒。
流通蒸汽滅菌：用 100℃蒸汽加熱 30min，常用于不耐高壓的物品（如某些藥液），但需多次滅菌（間歇滅菌）才能殺滅芽孢。
2、輻射滅菌/消毒法
（1）紫外線消毒
原理：波長 254nm 的紫外線可破壞微生物 DNA，抑制其繁殖。
適用范圍：空氣、物體表面（如無菌操作臺、實(shí)驗(yàn)室桌面）消毒。
特點(diǎn)：穿透力弱，僅作用于表面，需直接照射 30min 以上；對人體皮膚和眼睛有損傷，操作時(shí)需遠(yuǎn)離。
（2）電離輻射滅菌
原理：如 γ 射線、電子束，可破壞微生物核酸和蛋白質(zhì)。
適用范圍：一次性醫(yī)療用品（如注射器、手術(shù)衣）、食品、藥品等。
特點(diǎn)：穿透力強(qiáng)，可在常溫下滅菌，不破壞物品結(jié)構(gòu)，但設(shè)備成本高。
3、過濾除菌法
原理：用孔徑≤0.22μm 的濾膜過濾液體或氣體，截留微生物（包括細(xì)菌、真菌，但無法過濾病毒）。
適用范圍：不耐高溫的液體（如血清、抗生素溶液、酶制劑）或氣體（如無菌操作臺的空氣過濾）。
常用設(shè)備：針頭式濾器、薄膜過濾器。
4、其他物理方法
超聲波消毒：通過高頻聲波產(chǎn)生振動，破壞微生物結(jié)構(gòu)，常用于醫(yī)療器械表面清洗（輔助消毒，需配合化學(xué)消毒劑）。
低溫抑菌：如冰箱（4℃）、冷凍（-20℃），雖不能滅菌，但可抑制微生物生長，用于樣品暫存。
二、化學(xué)消毒/滅菌法
利用化學(xué)藥劑殺滅微生物，根據(jù)作用強(qiáng)度分為高效消毒劑（可殺滅芽孢）、中效消毒劑（殺滅細(xì)菌繁殖體、真菌、病毒，不殺芽孢）、低效消毒劑（僅殺滅部分細(xì)菌繁殖體）。
1、高效消毒劑（可替代滅菌，用于不耐高溫物品）
含氯消毒劑（如次氯酸鈉）：
作用：破壞微生物細(xì)胞膜和酶系統(tǒng)，對細(xì)菌、病毒、芽孢均有效。
應(yīng)用：地面、墻面、污染物表面消毒，需現(xiàn)配現(xiàn)用（易揮發(fā)）。
過氧化物類（如過氧化氫、過氧乙酸）：
作用：強(qiáng)氧化性，殺滅所有微生物。
應(yīng)用：醫(yī)療器械消毒（如內(nèi)鏡）、空氣熏蒸消毒（過氧乙酸熏蒸可用于密閉空間）。
甲醛：
作用：與微生物蛋白質(zhì)結(jié)合，破壞結(jié)構(gòu)，可殺滅芽孢。
應(yīng)用：實(shí)驗(yàn)室無菌室、培養(yǎng)箱的熏蒸消毒（需密閉 12~24h，刺激性強(qiáng)，需通風(fēng)后使用）。
2、中效消毒劑
酒精（75% 乙醇）：
作用：使蛋白質(zhì)變性，殺滅細(xì)菌繁殖體、真菌、部分病毒（對芽孢無效）。
應(yīng)用：皮膚、醫(yī)療器械表面消毒（如移液槍、試管外壁），濃度過高（如 95%）會使蛋白質(zhì)凝固形成保護(hù)層，降低效果。
碘伏：
作用：含碘復(fù)合物，殺滅細(xì)菌、真菌、病毒。
應(yīng)用：皮膚、黏膜消毒（如接種前皮膚消毒），刺激性小于碘酒。
3、低效消毒劑
季銨鹽類：
作用：破壞細(xì)胞膜，對革蘭氏陽性菌效果好，對真菌、病毒、芽孢弱。
應(yīng)用：醫(yī)療器械、環(huán)境表面的清潔消毒（如桌面擦拭）。
氯己定（洗必泰）：
作用：抑菌為主，對革蘭氏陽性菌作用強(qiáng)。
應(yīng)用：皮膚、口腔黏膜消毒（如術(shù)前洗手）。
三、選擇原則
根據(jù)物品性質(zhì)：耐高溫耐濕者優(yōu)先選高壓蒸汽滅菌；不耐高溫者選過濾、化學(xué)消毒或輻射。
根據(jù)微生物類型：處理芽孢污染需用高效方法（如高壓滅菌、過氧乙酸）；普通細(xì)菌污染可用酒精、煮沸等。
根據(jù)場景需求：實(shí)驗(yàn)室無菌操作需滅菌；日常環(huán)境清潔可用消毒（如桌面用 75% 酒精）。
合理選擇消毒/滅菌方法是控制污染的關(guān)鍵，需結(jié)合安全性、有效性和經(jīng)濟(jì)性綜合考慮。
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