固體培養(yǎng)基質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)之物理化學(xué)與微生物學(xué)指標(biāo)!
小楊 / 2025-05-07 09:06:45
百歐博偉生物:常用固體培養(yǎng)基的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)通常涵蓋物理化學(xué)、微生物學(xué)及無菌性等多個方面,以確保培養(yǎng)基的性能和實驗結(jié)果的可靠性。以下是主要質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及示例:
一、物理化學(xué)指標(biāo)
1、pH值
不同培養(yǎng)基的pH范圍需符合規(guī)定(如營養(yǎng)瓊脂:7.2±0.2;麥康凱瓊脂:7.1±0.2)。
檢測方法:使用校準(zhǔn)后的pH計測量滅菌后的培養(yǎng)基。
2、凝膠強度
瓊脂濃度需適中,確保培養(yǎng)基凝固均勻、無裂紋(通常瓊脂含量1.5%-2.0%)。
檢測方法:傾注平板后觀察凝固狀態(tài),傾斜45°不流動。
3、水分含量
干燥培養(yǎng)基的水分含量需≤5%,避免結(jié)塊或潮解。
4、外觀
顏色均勻(如血瓊脂呈暗紅色,SS瓊脂呈淺黃色),無雜質(zhì)、氣泡或干裂。
二、微生物學(xué)指標(biāo)
1、生長率測試
合格標(biāo)準(zhǔn):菌落數(shù)量與理論值差異≤50%,且無抑制現(xiàn)象。
2、選擇性培養(yǎng)基測試
支持目標(biāo)菌生長:如麥康凱瓊脂上大腸埃希氏菌應(yīng)形成紅色菌落。
抑制非目標(biāo)菌:如麥康凱瓊脂上金黃色葡萄球菌應(yīng)被抑制。
示例:SS瓊脂應(yīng)支持沙門氏菌生長(黑色菌落),抑制大腸埃希氏菌。
3、特異性反應(yīng)
生化反應(yīng)驗證(如巧克力瓊脂上的流感嗜血桿菌需依賴V因子生長)。
三、無菌性檢查
抽樣檢測
隨機抽取3%-5%的培養(yǎng)基平板,置合適溫度培養(yǎng)24-48小時,觀察有無污染菌生長。
合格標(biāo)準(zhǔn):無任何微生物生長。
四、穩(wěn)定性與儲存條件
1、有效期
未開封干燥培養(yǎng)基:2-25℃保存,有效期2-3年。
已滅菌液體培養(yǎng)基:2-8℃保存,建議1周內(nèi)使用。
傾注平板:密封后2-8℃保存≤1個月,避免干燥。
2、復(fù)溶與滅菌驗證
滅菌后培養(yǎng)基需重新檢測pH和性能,避免過熱破壞成分(如血瓊脂避免高溫滅菌)。
五、標(biāo)準(zhǔn)菌株與質(zhì)控頻率
1、標(biāo)準(zhǔn)菌株
2、質(zhì)控頻率
每批新購培養(yǎng)基需檢測;常規(guī)使用中每季度或更換供應(yīng)商時復(fù)查。
六、常見培養(yǎng)基示例
培養(yǎng)基類型 關(guān)鍵質(zhì)控點
血瓊脂 支持鏈球菌生長(β-溶血),抑制雜菌;無菌溶血或變色。
七、記錄與報告
記錄所有質(zhì)控數(shù)據(jù)(pH、菌株生長情況、無菌性結(jié)果等)。
不合格批次需標(biāo)識、隔離并追溯原因。
八、總結(jié)
固體培養(yǎng)基的質(zhì)控需結(jié)合物理化學(xué)驗證、微生物性能測試及無菌性檢查,遵循標(biāo)準(zhǔn)操作流程。定期質(zhì)控可確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性,避免因培養(yǎng)基問題導(dǎo)致的假陰性/陽性結(jié)果。
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