真菌檢測質(zhì)量控制的操作要點(diǎn)及常見問題與解決措施！
小楊 / 2025-04-30 13:09:54
百歐博偉生物：真菌檢測的質(zhì)量控制是確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，尤其在臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測或食品安全等領(lǐng)域。以下是真菌檢測質(zhì)量控制的要點(diǎn)和措施：
一、檢測前質(zhì)量控制
1、樣本采集與運(yùn)輸
正確采集：根據(jù)檢測目標(biāo)（如血液、痰液、組織、環(huán)境樣本等）選擇合適的采集方法和工具（無菌容器、拭子等）。
保存與運(yùn)輸：樣本需在指定溫度（如4℃或冷凍）和時(shí)間內(nèi)運(yùn)輸，避免污染或真菌過度生長。
記錄信息：記錄樣本來源、采集時(shí)間、患者病史（如免疫狀態(tài)）等關(guān)鍵信息。
2、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與設(shè)備
無菌操作環(huán)境：生物安全柜需定期驗(yàn)證氣流和潔凈度。
設(shè)備校準(zhǔn)：顯微鏡、培養(yǎng)箱、PCR儀等需定期校準(zhǔn)和維護(hù)。
3、試劑與耗材
試劑有效性：染色劑、分子檢測試劑需定期驗(yàn)證性能。
無菌耗材：培養(yǎng)皿、移液管等需確保無菌。
二、檢測過程質(zhì)量控制
1、顯微鏡檢查
雙盲復(fù)核：由兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員獨(dú)立判讀結(jié)果，減少主觀誤差。
2、培養(yǎng)與鑒定
培養(yǎng)條件：控制溫度（25-30℃）、濕度、CO?濃度（某些酵母需要）和培養(yǎng)時(shí)間（如絲狀真菌需7-14天）。
形態(tài)學(xué)鑒定：結(jié)合菌落形態(tài)（顏色、質(zhì)地）、顯微鏡特征（孢子、菌絲結(jié)構(gòu)）進(jìn)行鑒定，必要時(shí)使用分子方法確認(rèn)。
3、分子檢測（PCR、測序等）
防污染措施：分區(qū)域操作（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），使用UNG酶防污染。
內(nèi)對照與標(biāo)準(zhǔn)品：添加內(nèi)參基因或標(biāo)準(zhǔn)品監(jiān)控抑制物和擴(kuò)增效率。
數(shù)據(jù)庫驗(yàn)證：確保測序結(jié)果與權(quán)威數(shù)據(jù)庫比對準(zhǔn)確。
三、檢測后質(zhì)量控制
1、結(jié)果判讀與報(bào)告
標(biāo)準(zhǔn)化報(bào)告：明確標(biāo)注菌種名稱、藥敏結(jié)果和臨床意義。
臨界值管理：如定量PCR的Ct值需結(jié)合臨床判斷。
結(jié)果復(fù)核：異常結(jié)果（如罕見菌種）需復(fù)核或送參考實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)。
2、數(shù)據(jù)記錄與追溯
完整記錄：保存原始數(shù)據(jù)（如培養(yǎng)照片、PCR擴(kuò)增曲線）、操作日志和質(zhì)控結(jié)果。
可追溯性：樣本編號(hào)、檢測人員、試劑批號(hào)等信息需完整存檔。
四、外部質(zhì)量評估（EQA）
1、參與室間質(zhì)評：定期參加國內(nèi)外權(quán)威機(jī)構(gòu)組織的真菌檢測能力驗(yàn)證。
2、實(shí)驗(yàn)室間比對：與其他實(shí)驗(yàn)室交換樣本進(jìn)行結(jié)果比對，確保檢測一致性。
五、人員培訓(xùn)與能力評估
1、定期培訓(xùn)：更新真菌分類、檢測技術(shù)（如分子檢測）和生物安全知識(shí)。
2、能力考核：通過盲樣測試、模擬操作評估技術(shù)人員水平。
六、常見問題與解決措施
量控制的操作要點(diǎn)及常見問題與解決措施.png)
七、生物安全
風(fēng)險(xiǎn)分級(jí)：根據(jù)真菌致病性（如隱球菌、組織胞漿菌）采取相應(yīng)防護(hù)。
廢物處理：污染耗材需高壓滅菌后處理。
通過嚴(yán)格的全流程質(zhì)量控制，可顯著提高真菌檢測的準(zhǔn)確性，為臨床診療、環(huán)境監(jiān)測或食品安全提供可靠依據(jù)。
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