微生物計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查的一般要求與操作方法！
小楊 / 2024-06-06 09:25:54
計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查
1、一般要求
2、胰酪大豆胨瓊脂（TSA）
無菌性檢查：取已滅菌TSA注皿，于30-35℃培養(yǎng)3天，應(yīng)無菌落生長。
試驗(yàn)用菌種：金葡、銅綠、枯草、白念、黑曲
接種方法：
涂布法：分別接種不大于100cfu試驗(yàn)用菌懸液于TSA平板表面；
傾注法：分別接種不大于100cfu試驗(yàn)用菌懸液于無菌平皿中，傾注約15ml該培養(yǎng)基，輕輕搖勻。
判斷標(biāo)準(zhǔn)：與對(duì)照培養(yǎng)基比較，菌落平均數(shù)比值在0.5-2（50%-200%）范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小一致。
3、胰酪大豆胨液體（TSB）
無菌性檢查：取已滅菌的TSB，于30-35℃培養(yǎng)不少于3天，培養(yǎng)基應(yīng)澄清。
試驗(yàn)用菌種：金葡、銅綠、枯草
接種方法：
涂布法：分別接種試驗(yàn)用菌懸液于該培養(yǎng)基中，接種量不大于100cfu，搖勻，培養(yǎng)。
適用性檢查：30-35℃培養(yǎng)不超過3天。
判斷標(biāo)準(zhǔn)：金葡、銅綠、枯草接種后，與對(duì)照培養(yǎng)基比較，試驗(yàn)菌生長良好。
備注：該培養(yǎng)基同時(shí)用于稀釋液的制備和控制菌檢查時(shí)，需考慮同時(shí)滿足計(jì)數(shù)和控制菌檢查培養(yǎng)基適用性檢查控制要求。
4、沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）
無菌性檢查：取已滅菌的SDA注皿,于20-25℃培養(yǎng)5天,應(yīng)無菌落生長。
接種方法：
涂布法:分別接種不大于100cfu允試驗(yàn)用菌懸液于該平板表面
傾注法:接種大于1cfu試驗(yàn)用菌懸液于無菌平皿中,傾注約15ml該培養(yǎng)基,輕輕搖勻。
適用性檢查：白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培養(yǎng)不大于5天
判斷標(biāo)準(zhǔn)：與對(duì)照培養(yǎng)基比較菌落平均數(shù)比值在0.5-2(50%一200%)范圍且菌落大小、形態(tài)一致。
備注:如該培養(yǎng)基用于控制菌白色念珠菌的檢查時(shí),同時(shí)需要滿足捌菌項(xiàng)下培養(yǎng)基適用性檢查要求。
5、沙氏葡萄糖瓊脂+抗生素
無菌性檢查：取已滅菌的SDA注皿,于20-25℃培養(yǎng)5天,應(yīng)無菌落生長。
試驗(yàn)用菌種：
抑菌性檢查：枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌
促生長能力：白色念珠菌、黑曲霉 。
常用抗生素：
（1）慶大霉素：廣譜。對(duì)G-，G+菌有較好的抗菌作用。
（2）氯霉素：廣譜。對(duì)G-菌作用強(qiáng)；對(duì)G+菌作用不及青霉素與四環(huán)素。
接種方法：
抑菌性：接種枯草、金葡、銅綠菌懸液不少于100cfu。
促生長能力：接種白色念珠菌、黑曲霉菌懸液不大于100cfu。
適用性檢查：
白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培養(yǎng)不大于5天。
與對(duì)照培養(yǎng)基比較，菌落平均數(shù)比值在0.5-2范圍內(nèi)。
判斷標(biāo)準(zhǔn)：枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌不得生長。
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