百歐博偉康寧木霉知識(shí)簡介！
小楊 / 2019-12-28 09:22:15
康寧木霉，菌絲有隔膜,蔓延生長,廣鋪于固體培養(yǎng)基上,菌外觀為淺綠,黃綠或綠色,反面無色,分生孢子.梗為菌絲的短側(cè)枝,其上對(duì)生或互生分枝,分枝上又可繼續(xù)分枝,形成2級(jí),3級(jí)分枝,分枝末端即為瓶狀梗.分生孢子由小梗相繼生出面,靠黏液把它們聚成球形或近球形的孢子頭,分生孢子卵形成橢圓形,壁光滑.單個(gè)孢子近無色,形成堆狀為綠色,與此相似的還有綠色木霉！此菌有很強(qiáng)的纖維素霉及纖維,二糖淀粉酶等,它能利于農(nóng)副產(chǎn)品,如麥桿,木材,木屑等纖維素原料,使之轉(zhuǎn)變?yōu)樘琴|(zhì)原料。
基本信息
平臺(tái)編號(hào)：bio-52386
拉丁屬名：Trichoderma koningii Oudem
中文名：康寧木霉
培養(yǎng)基：AS3.3743
培養(yǎng)基編號(hào)：14,17
培養(yǎng)溫度：25-28℃
用途：僅供科研使用
康寧木霉微生物培養(yǎng)方法：
1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜，對(duì)平板的要求比較高，可參照以下步驟：
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展，使之分布均勻。
康寧木霉實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：
1.稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2.干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3.高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4.過濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
康寧木霉低溫保存法：
1.簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于 4℃ 冰箱保存 , 保存時(shí)間不超過 1 ～ 2 個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟 , 以隔絕外界空氣和水汽 , 保持時(shí)間可達(dá) 3 ～ 4 個(gè)月。
2.液氮超低溫保存法，將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在 10% 甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃ 時(shí)，即可置于 -150 ～ -196℃ 的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長期保存。