變異鏈球菌 BIOBW生物自主菌種保藏
小楊 / 2019-12-02 09:48:25
變異鏈球菌（streptococcus mutans，簡稱變鏈菌）是一種生長于口腔的細菌，具有分泌酸性物質腐蝕牙釉質的特點，為人類主要致齲齒菌之一，在口腔醫(yī)學領域被廣泛研究。
基本信息
平臺編號：bio-53025
規(guī)格：0
拉丁屬名：Streptococcus mutans
中文名：變異鏈球菌
其它編號：ATCC25175=NCTC10449
培養(yǎng)基編號：114
培養(yǎng)溫度：37
用途：模式菌株，培養(yǎng)基測試。
保藏條件：斜面菌種和凍干菌種應在 2-8°C 保存。西林瓶請置于-20℃保存。
簡單介紹
變異鏈球菌是早在1924年Clarke已經報告過變異鏈球菌是齲齒的病原菌。這種菌在普通培養(yǎng)基中呈球形，而在葡萄糖培養(yǎng)基中菌體變長，所以叫作變異鏈球菌。但當時普遍認為嗜酸桿菌等是齲齒最主要的病原菌，而變異鏈球菌并未得到重視。乃至40年后才又重新發(fā)現(xiàn)變異鏈球菌是引起齲齒最主要的細菌。變異鏈球菌與齲齒的關系主要是：①能在牙面上形成水不溶性的多糖類，牢固地黏著在牙面上；②在同樣pH條件下，變異鏈球菌比血鏈球菌和乳酸桿菌等能溶出更多的鈣；③變異鏈球菌能使蔗糖變?yōu)槠暇厶?，并使葡萄糖幾乎全部變?yōu)槿樗帷Ｗ儺愭溓蚓驱x齒最主要的病原菌，但不是唯一的，其他產酸菌也能參與齲齒的發(fā)生。冠部齲除變異鏈球菌外，乳酸桿菌也有一定作用；根部齲除變異鏈球菌外，黏性放線菌(Actinomyces visco-sus)最被重視。
相關研究
通過變異鏈球菌臨床分離株耐酸因子F-AT—Pase亞基B結構基因uncD的遺傳多態(tài)性和mRNA表達水平差異，探討其與細菌耐酸力的關系。
方法實驗株包括18株高耐酸和20株低耐酸變鏈菌臨床株，以特異引物從細菌組DNA擴增uncD，行限制性內切酶長度多態(tài)性分析（RFLP）和測序比較；應用半定量RT-PCR兩步法和凝膠成像系統(tǒng)定量軟件，對20株不同基因型和不同耐酸力變鏈菌uncD基因的mRNA表達水平進行評價和比較。結果AluI—RFLP產生A、B基因型，測序證實導致多態(tài)出現(xiàn)的基因變異不在uncD的功能區(qū)和催化結構域；這兩種基因型在不同耐酸力菌株的分布不同（P〈0．05），高耐酸性菌株中A型基因uncD的檢出高于低耐酸力菌株。不同耐酸力菌株uncD的mRNA表達水平不同（P〈0．05），但A、B兩基因型菌株uncD的mRNA表達差異沒有統(tǒng)計學意義（P〉0．05）。結論F-ATPase的β亞基基因具有明顯的遺傳多態(tài)性，基因型和mRNA表達水平的多態(tài)性與菌株的耐酸力有一定的關系，雖然β亞基基因功能區(qū)高度保守，但在酸耐受適應中，仍表現(xiàn)為F—ATPase較活躍上調的亞基基因。
注意事項
1）凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預留，用 0.1-0.2ml 的培養(yǎng)液或無菌水溶解，接種在 1-2 支平板上，因凍干粉處于休眠狀態(tài)，請勿接種多支斜面或平板，以避免因接種量不足而導致復蘇不成功；如有不明白之處，請務必先咨詢我單位技術人員，避免不必要的損失；
2）微生物菌種應保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；
3）菌種操作應在無菌條件下進行；轉種完畢，應經滅菌再做丟棄處理；
4）應根據(jù)菌種狀況及時轉接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；
5）菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產性能下降，應及時和中國微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系。
單層凍干管打管說明書
1、安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。
2、注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在 4-10℃的環(huán)境下，某些菌種經過冷凍干燥并抽真空保存的，開啟后必須一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作為保護劑，里面菌體為少數(shù)，復蘇時要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造成復蘇不成功；
3、凍干菌種經過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，有時延滯期較長，如在說明書建議的培養(yǎng)時間還未長起來，請繼續(xù)在相應的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時或者更長時間，直至菌種培養(yǎng)完成；有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長，一般來說菌種穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實驗。
4、暫不啟開的安瓿管應于 4℃中保藏（特殊除外）。
5、凍干管打開后需一次用完，不能留存。
6、打管操作需由專業(yè)微生物技術人員在相應的防護設備中進行，生物危害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作，打管時凍干管應遠離面部，保護眼睛。
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