葡萄球菌凝固酶試驗被廣泛地用于常規(guī)鑒定金黃色葡萄球菌與其他葡萄球菌。試管法凝固酶試驗稱為葡萄球菌凝固酶，玻片法為檢測凝聚因子。
1．凝聚因子試驗：
取1滴蒸餾水于潔凈的玻片上，用接種環(huán)挑取待檢菌一環(huán)置于蒸餾水中，制成濃的菌懸液，無自凝現(xiàn)象。然后加一環(huán)家兔血漿混合，10s內(nèi)觀察結(jié)果，出現(xiàn)明顯細菌凝塊為陽性，否則為陰性。如超過 10s可出現(xiàn)假陽性，有10％一15％金黃色葡萄球菌呈假陰性，因此必須用試管法驗證凝聚因子試驗。
操作過程中的注意點：
10s內(nèi)觀察結(jié)果。
必須制備濃厚的均勻菌懸液。
用EDTA抗凝的兔血漿為最好。
加血漿后不要再混攪，以免細菌凝塊分散變小。
生長在高鹽培養(yǎng)基上的菌落可出現(xiàn)自凝或假陽性。
2．葡萄球菌凝固酶試驗：
用生理鹽水將血漿4倍稀釋，取0.5ml。然后挑取3～5個菌落于稀釋血漿中，成濃菌懸液。置37℃水浴，3～4h后讀取結(jié)果，凝固者為陽性。若陰性，繼續(xù)觀察到24h，不凝固者為陰性。試驗應(yīng)同時作陽性、陰性對照。
試管法葡萄球菌凝固酶試驗陽性者，應(yīng)見到明顯的纖維蛋白凝膠塊，出現(xiàn)羊毛狀或纖維狀沉淀物并非真正凝固，應(yīng)判為陰性。中間型葡萄球菌、豬葡萄球菌需要較長時間孵育，才可出現(xiàn)陽性。
凝固酶試驗應(yīng)考慮下述情況：
某些金黃色葡萄球菌產(chǎn)生溶纖維蛋白酶，溶解纖維蛋白凝塊。
所用血漿缺乏纖維蛋白原。
試驗菌株不純。
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