微生物查詢網(wǎng)：提取噬菌體基因組的方法有多種，下面是按照Ando文章中的方法整理的噬菌體基因組提取方法，實(shí)驗(yàn)的時(shí)候可以參考。
1、按0.1-0.01的感染復(fù)數(shù)（MOI）將噬菌體接種到200ml對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌液，培養(yǎng)至菌液變澄清。
2、按1%的比例(v/v)加入氯仿，37°C振蕩30min，裂解菌體。
3、裂解后的菌液于8000g離心5min，然后用0.22μm孔徑濾膜過(guò)濾。
4、濾液中加入216μl緩沖液L1（20mg/ml RNase A，6mg/ml DNase I，0.2mg/mL BSA，10mM EDTA，100 mM Tris-HCl和300 mM NaCl，pH 7.5），在37°C輕輕振蕩1小時(shí)。
5、然后加入30ml冰冷的緩沖液L2（30%聚乙二醇（PEG）6000，3M NaCl），4°C放置過(guò)夜。
6、4°C 10000g離心30分鐘。
7、棄上清，沉淀用用9ml緩沖液L3（100mM Tris-HCl，100mM NaCl，25mM EDTA，pH7.5）重懸。
8、然后加入9ml緩沖液L4（4% SDS），70°C孵育20min。
9、冰浴冷卻后，加入9ml緩沖液L5（2.55 M醋酸鉀，pH 4.8），4°C 10000g離心30min。
10、上清液用核酸提取純化試劑盒（如QIAGEN-tip 100）提取噬菌體基因組DNA。
參考文獻(xiàn)：
Ando H, et al. Engineering Modular Viral Scaffolds for Targeted Bacterial Population Editing. Cell Systems 2015,1(3): 187-196.
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有對(duì)菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對(duì)購(gòu)買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得最優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因?yàn)榇?，北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國(guó)內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長(zhǎng)期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！