1 染色鏡檢:李斯特氏菌為革蘭氏陽(yáng)性短桿菌,大小為(0.4 μm~0.5 μm)×(0.5 μm~2.0 μm);用生理鹽水制成菌懸液,在油鏡或相差顯微鏡下觀察,該菌出現(xiàn)輕微旋轉(zhuǎn)或翻滾樣的運(yùn)動(dòng)。
2 動(dòng)力試驗(yàn):李斯特氏菌有動(dòng)力,呈傘狀生長(zhǎng)或月牙狀生長(zhǎng)。
3 生化鑒定:挑取純培養(yǎng)的單個(gè)可疑菌落,進(jìn)行過(guò)氧化氫酶試驗(yàn),過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性反應(yīng)的菌落繼續(xù)進(jìn)行糖發(fā)酵試驗(yàn)和MR-VP 試驗(yàn)。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的主要生化特征見(jiàn)表1。
4 溶血試驗(yàn):將羊血瓊脂平板底面劃分為20 個(gè)~25 個(gè)小格,挑取純培養(yǎng)的單個(gè)可疑菌落刺種到血平板上,每格刺種一個(gè)菌落,并刺種陽(yáng)性對(duì)照菌(單增李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌)和陰性對(duì)照菌(英諾克李斯特氏菌),穿刺時(shí)盡量接近底部,但不要觸到底面,同時(shí)避免瓊脂破裂,36 ℃±1 ℃培養(yǎng)24 h~48 h,于明亮處觀察,單增李斯特氏菌和斯氏李斯特氏菌在刺種點(diǎn)周?chē)a(chǎn)生狹小的透明溶血環(huán),英諾克李斯特氏菌無(wú)溶血環(huán),伊氏李斯特氏菌產(chǎn)生大的透明溶血環(huán)。
5 協(xié)同溶血試驗(yàn) (cAMP):在羊血瓊脂平板上平行劃線接種金黃色葡萄球菌和馬紅球菌,挑取純培養(yǎng)的單個(gè)可疑菌落垂直劃線接種于平行線之間,垂直線兩端不要觸及平行線,于30 ℃±1 ℃培養(yǎng)24 h~48 h。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌在靠近金黃色葡萄球菌的接種端溶血增強(qiáng),斯氏李斯特氏菌的溶血也增強(qiáng),而伊氏李斯特氏菌在靠近馬紅球菌的接種端溶血增強(qiáng)。
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