球菌檢驗
第一,金黃色葡萄球菌的檢驗
樣品處理:無菌取25g或25mL食品樣品,放入225mL滅菌生理鹽水中均質(zhì),制成10-1稀釋液。
增菌培養(yǎng): 將10-1稀釋液接入7.5%NaCl肉湯或胰蛋白胨肉湯中,37°C培養(yǎng)24小時。
分離培養(yǎng):將上述稀釋液或培養(yǎng)液分別劃線血平板和Baird-Parker平板,置37°C培養(yǎng)24~48小時。金黃色葡萄球菌在血平板上呈金黃或白色菌落,大而凸起,表面光滑,周圍有溶血圈。在Baird-Parker平板上菌落為圓形,直徑2~3mm,顏色灰或黑色,周圍有一渾濁帶。
染色觀察:從平板上挑取可疑性菌落進(jìn)行革蘭氏染色,金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性,顯微鏡下呈葡萄狀排列無芽胞、莢膜,直徑0.5~1μm。
血漿凝固酶試驗:吸取0.5mL兔血漿與0.5mL金黃色葡萄球菌試液浸液肉湯24小時培養(yǎng)物充分混勻,置36±1°C培養(yǎng),每隔半小時觀察一次,連續(xù)觀察6小時,出現(xiàn)凝固,即將小試管傾斜或倒置時,內(nèi)容物不流動,判為陽性。同時做陰陽性對照。耐熱核酸酶試驗:將24小時肉湯培養(yǎng)物沸水浴處理15min,用接種環(huán)劃線刺種于甲苯胺蘭-DNA平板,36±1°C培養(yǎng)24小時,在刺種線周圍出現(xiàn)淡粉色者為陽性。本試驗金黃色葡萄球菌為陽性。
第二,金黃色葡萄球菌腸毒素檢測
金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測主要有動物試驗、血清學(xué)試驗、免疫熒光試驗及酶聯(lián)免疫吸附等方法,在此就不一一贅述。
預(yù)防感染
第一,防止金黃色葡萄球菌污染食品
防止帶菌人群對各種食物的污染:定期對生產(chǎn)加工人員進(jìn)行健康檢查,患局部化膿性感染(如疥瘡、手指化膿等)、上呼吸道感染(如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等)的人員要暫時停止其工作或調(diào)換崗位。對肉制品加工廠,患局部化膿感染的禽、畜尸體應(yīng)除去病變部位,經(jīng)高溫或其他適當(dāng)方式處理后進(jìn)行加工生產(chǎn)。
第二,防止金黃色葡萄球菌腸毒素的生成
應(yīng)在低溫和通風(fēng)良好的條件下貯藏食物,以防腸毒素形成;在氣溫高的春夏季,食物置冷藏或通風(fēng)陰涼地方也不應(yīng)超過6小時,并且食用前要徹底加熱。
第三,殺死金黃色葡萄球菌
金黃色葡萄球菌對熱和干燥的抵抗力較一般無芽胞細(xì)菌強(qiáng),加熱80℃30分鐘才被殺死。 物體表面覆蓋一層0.1mg/cm3濃度的超細(xì)tio2在光照條件下可快速有效殺滅。在干燥的膿汁、痰液中可存活2~3月。5%石炭酸中10~15分鐘死亡。對堿性染料敏感,十萬分之一的龍膽紫液即可抑制其生長。
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