簡明高效的外環(huán)境水軍團菌檢驗技術(shù)！
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2019-04-08 14:15:33
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簡明高效的外環(huán)境水軍團菌檢驗技術(shù)
前言
軍團菌的監(jiān)測檢驗工作一直是昂貴、煩瑣、低效的事。
為了使其變得簡易、輕松、高效，我們需要解決三個問題。
軍團菌檢驗的三個問題
1.簡明有效的檢驗程序的建立。
2.(保證質(zhì)量和價格合理的)成套軍團菌檢驗產(chǎn)品的穩(wěn)定供應(yīng)。
3.(高質(zhì)量、高效率和價格合理的)膜法過濾器的解決。
簡明高效的外環(huán)境水軍團菌培養(yǎng)分離程序簡介：
采樣：300ml（空調(diào)水）；1-5L（飲用水）
實際通過濾膜的水量：空調(diào)水300毫升；飲用管道水1000毫升。
濃縮：用合格的濾器（最好用負壓三頭濾器）過濾后剪碎濾膜。加入３毫升原水，放振蕩器上30秒．
酸處理：１毫升上述過濾水＋１毫升已標定酸，混勻后作用５分鐘．然后從中取0.1毫升接種GVPC瓊脂平板（在平板1/3處推干后，在另2/3處劃線分離）。
培養(yǎng)：將GVPC瓊脂平板放置于CO2培養(yǎng)箱或燭缸中''36℃培養(yǎng)4～6天。
篩選：挑取可疑（灰藍色光滑閃亮）菌落，同時點種GVPC瓊脂平板和血瓊脂平板（每個平板可點種10-20個菌落）。36℃培養(yǎng)2～4天，保留血平板完全不生長而GVPC平板生長良好的菌。
初步鑒定：
o菌落形態(tài)像。
o血瓊脂完全不生長。
oG(-)小桿菌
注意：
1. 從同一標本中分離多種軍團菌：
每個平板可挑取3～5個菌落，做玻片軍團菌血清分型（約有1/4左右的空調(diào)水標本中可能分離出兩種血清型以上的軍團菌''而為此必須使用能夠?qū)Ω鱾€軍團菌型別特別是嗜肺軍團菌1-8型單獨型別分型的軍團菌分型血清.）。
2. 定量報告(必須使用本操作程序和我們標定的酸處理液)：
使用標定過的酸液作酸處理，可根據(jù)軍團菌菌落數(shù)和簡單公式，作出標本中軍團菌數(shù)的定量報告(每毫升水中軍團菌活菌數(shù))。
公式1：每毫升水中軍團菌活菌數(shù) = 平板上軍團菌菌落數(shù)÷2.5(當濾膜過濾的標本水量固定為300毫升時''適用于此公式）。
公式2：每毫升水中軍團菌活菌數(shù) = 平板上軍團菌菌落數(shù)÷(X÷120) (當濾膜過濾的標本水量不固定時''適用于此公式）。
注: X = 公式2中實際經(jīng)過濾膜的水樣毫升數(shù)。
3. 避開鈉離子:
鈉離子對軍團菌的生長有顯著的抑制作用.因此在整個檢驗過程中''必須避免使用含鈉離子的試劑如生理鹽水(可用蒸餾水代替)。