1、檢驗(yàn)原理
霉菌和酵母菌數(shù)測(cè)定(Determination of molds and yeast count)是指化妝品檢樣在一定條件下培養(yǎng)后,1g或1ml化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌數(shù)量,籍以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛(wèi)生狀況。
本方法根據(jù)霉菌和酵母菌特有的形態(tài)和培養(yǎng)特性,在虎紅培養(yǎng)基上,置28℃±2℃培養(yǎng)72h,計(jì)算所生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌數(shù)。
2、儀器和設(shè)備
培養(yǎng)箱:28℃±2℃;振蕩器;天平;三角瓶:250ml;試管:15×150mm;平皿:直徑9cm;吸管:1ml、10ml;量筒:200ml;酒精燈; 高壓滅菌器
3、培養(yǎng)基和試劑℃
1)生理鹽水
與細(xì)菌總數(shù)測(cè)定用的生理鹽水一致。
2)虎紅﹙孟加拉紅﹚培養(yǎng)基
制法:將上述各成分﹙除虎紅外﹚加入蒸餾水中溶解后,再加入虎紅溶液分裝后,103.43kpa﹙121℃151b﹚20min高壓滅菌,另用少量乙醇溶解氯霉素,過(guò)濾溶解后加入培養(yǎng)基中,若無(wú)氯霉素,使用時(shí)每1000ml加鏈霉素30mg
4、操作步驟
1)樣品稀釋
與細(xì)菌菌落總數(shù)測(cè)定稀釋方法一致。
2)培養(yǎng)
取1:10、1:100、1:1000的檢液各1ml分別注入滅菌平皿內(nèi),每個(gè)稀釋各用2個(gè)平皿,注入融化并冷至45℃±1℃左右的虎紅培養(yǎng)基,充分搖勻。凝固后,翻轉(zhuǎn)平板,置28℃±1℃培養(yǎng)72h±2h,計(jì)數(shù)平板內(nèi)生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌數(shù)。若有霉菌蔓延生長(zhǎng),為避免影響其它霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)時(shí),于48h±2h應(yīng)及時(shí)將此平板取出計(jì)數(shù)。
3)計(jì)算方法
先點(diǎn)數(shù)每個(gè)平板上生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌菌落數(shù),求出每個(gè)稀釋度的平均菌落。判定結(jié)果時(shí),應(yīng)選取菌落數(shù)在5個(gè)~50個(gè)范圍之內(nèi)的平皿計(jì)數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后,即為每g﹙或每ml﹚檢樣中所含的霉菌和酵母菌數(shù)。其它范圍內(nèi)的菌落數(shù)報(bào)告應(yīng)參照菌落總數(shù)的報(bào)告方法報(bào)告之。
5.檢驗(yàn)結(jié)果
每g﹙或每ml﹚化妝品含霉菌和酵母菌數(shù)以CFU/g﹙ml﹚表示。
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