首先給大家普及一下什么是苛養(yǎng)菌？
苛養(yǎng)菌是一大類對生長環(huán)境、營養(yǎng)要求較苛刻的細(xì)菌，在普通環(huán)境中不能或難以生長。體外培養(yǎng)需添加特殊因子或其他營養(yǎng)成分。常見苛養(yǎng)菌有嗜血桿菌屬、鮑特菌屬、肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、卡他莫拉菌等。
主要苛養(yǎng)菌介紹
嗜血桿菌屬
（1）分類
與人類密切相關(guān)的嗜血桿菌有8種，比較常見的是流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌。
（2）細(xì)菌特性
嗜血桿菌培養(yǎng)時(shí)必須供給X、V因子，新鮮血液含X、V因子，但V因子處于抑制狀態(tài)，必須將其加熱80℃～90℃才能釋放出來，故巧克力瓊脂適合于嗜血桿菌生長。不同的嗜血桿菌對X、V因子需求有所不同。
將流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌共同培養(yǎng)后，后者合成較多V因子，可促進(jìn)流感嗜血桿菌生長，靠近金黃色葡萄球菌的流感嗜血桿菌菌落較大，反之，菌落較小，稱之為衛(wèi)星現(xiàn)象。
（3）臨床意義
嗜血桿菌常寄居于正常人上呼吸道，可引起上呼吸道、泌尿生殖道感染、腦膜炎、中耳炎、心內(nèi)膜炎、菌血癥。流感嗜血桿菌主要引起原發(fā)性化膿感染和繼發(fā)性感染，其莢膜b型株毒力最強(qiáng)。杜克雷嗜血桿菌為軟下疳病原菌。
（4）微生物檢驗(yàn)
采集腦脊液、血液、膿液、痰液、咽拭子等標(biāo)本進(jìn)行檢查，因苛養(yǎng)菌不易存活，標(biāo)本宜保持濕潤，及時(shí)送檢。
苛養(yǎng)菌培養(yǎng)陰性時(shí)的處理程序：
1、仔細(xì)查對標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。
2、標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：
1)拭子、分泌物標(biāo)本 標(biāo)本涂于普通血瓊脂平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。
2)尿液標(biāo)本 取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線，再畫線分離后置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。
3)引流液 標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣畫線分離接種普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板，置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。
4)痰液或咽拭子標(biāo)本 無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板原始線，再畫線分離后置C02缸， 35℃溫箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出肺炎球菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。
5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本 以無菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于血平板、布氏血平板成原始線，再分離畫線后置于C02缸，放入35℃溫箱培養(yǎng)。另取約1g標(biāo)本接種堿性蛋白胨水中，35℃溫箱培養(yǎng)24-72小時(shí)，再轉(zhuǎn)種高鹽平板、中國蘭平板、山梨醇麥康凱平板。
培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出弧菌、螺桿菌等細(xì)菌。
6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本 標(biāo)本置無菌管中，加入增菌液2ml，35℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無混濁，采樣轉(zhuǎn)種血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線，再畫線分離后置于C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。