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1. 透明圈檢測法和平板涂布法的區(qū)別
① 透明檢測法：采用在瓊脂營養(yǎng)培養(yǎng)基中添加碳酸鈣作為檢測培養(yǎng)基，同時采用稀釋2億倍的樣品菌懸液1毫升，與上述碳酸鈣營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混合，傾注平板的方法，計算在碳酸鈣平板培養(yǎng)基中培養(yǎng)48小時，并產(chǎn)生乳酸鈣透明圈的菌落，即為乳酸糞腸球菌活菌落的科學檢測和計數(shù)方法。
② 平板涂布檢測法：是國內(nèi)同行普遍采用的檢測方法，與透明圈檢測方法的區(qū)別是，直接使用瓊脂營養(yǎng)培養(yǎng)基作為檢測培養(yǎng)基，不添加碳酸鈣，其次，制作培養(yǎng)平板的方法是在已凝固的平板培養(yǎng)基上面，注入0.1毫升稀釋適當倍數(shù)后的菌懸液，用無菌玻璃刮鏟將菌懸液均勻地涂于瓊脂表面（也叫涂抹平板計數(shù)法），再增培養(yǎng)48小時，長出菌數(shù)即算為乳酸菌；
可見，兩種檢測方法的區(qū)別有以下幾個：
① 培養(yǎng)基有所不同：透明圈檢測方法添加了碳酸鈣，而平板涂布檢測方法沒有添加碳酸鈣；
② 制作平板的方法有所不同：透明圈檢測方法是采用樣品菌液與呈溶解狀態(tài)的培養(yǎng)基混合，傾注平板的方法；而平板涂布檢測方法是采用在已凝固好的平板培養(yǎng)基上，注入0.1毫升樣品菌液，用玻璃刮鏟涂布的方法；
③ 最終長出來的菌落特征有所不同：透明圈檢測方法長出的乳酸菌菌落周圍有一圈明顯的透明圈，透明圈越大，說明產(chǎn)乳酸能力越強；而平板涂布檢測方法長出來的菌落周圍沒有透明圈，與普通細菌長出的菌落沒有區(qū)別，無法直接鑒定是否是乳酸菌。
④ 最終還有一個區(qū)別，就是檢測出來的結(jié)果上有區(qū)別，采用透明圈檢測方法檢測出來的結(jié)果，比采用平板涂布法檢測出來的結(jié)果要少很多，幾乎少了10%以上；
2.2 檢測方法的科學性對產(chǎn)品判斷至關(guān)重要
采用透明圈檢測方法是最科學的檢測方法，是最能反映出乳酸菌活性的方法，而目前國內(nèi)比較普遍的檢測方法是平板涂布法，并不能直接說明所長出來的菌落就是乳酸菌，也不能直接反映乳酸菌的活性如何；
用透明圈檢測出來的乳酸菌的含菌量與價格是成正比的， 與產(chǎn)品是否包埋保護處理也是成正比的
含乳酸菌越高，價格越貴,但這一點還是次要的，更為重要的是：產(chǎn)品是否采用了包埋和保護技術(shù)，對乳酸菌產(chǎn)品來說是非常關(guān)鍵的，因為乳酸菌非常容易在運輸保存和制粒過程中損失殆盡；有些產(chǎn)品雖然含菌量非常高，但卻也很脆弱，容易失活，這也是沒有意義的產(chǎn)品。
透明圈乳酸菌檢測方法簡述如下：
①、檢測培養(yǎng)基：蛋白胨15g，牛肉膏5g，葡萄糖20g，氯化鈉5g，碳酸鈣10g，瓊脂粉10g，水1000ml，115～121℃滅菌20min，滅菌后放置水浴52℃保溫備用。
②、稀釋方法：取1克樣品放入添加99ml無菌水的帶玻璃珠的250ml三角瓶中，搖床180rpm震蕩30min，即為10－2樣品溶液，再從中取1ml至添加99ml無菌生理鹽水的三角瓶中，稀釋至10－4，以此類推稀釋至10－8，即稀釋了1億倍
③、倒制培養(yǎng)平板，從上述已稀釋了1億倍的乳酸菌懸液中取1ml，在無菌操作臺上注入90mm培養(yǎng)皿中，再將已經(jīng)滅了菌的保持在52℃水浴鍋中的呈溶解狀態(tài)的培養(yǎng)基，倒入15毫升左右于培養(yǎng)皿中，全部浸到培養(yǎng)皿，與菌懸液充分混合均勻（倒入培養(yǎng)基后，馬上用手轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，轉(zhuǎn)動幾下，讓其混合均勻），然后等其凝固再移入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，注意最后一步倒平皿必須在超凈臺無菌操作，以免雜菌污染。每次稀釋均要換滅好菌的移液管。
④、培養(yǎng)條件：33℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48～72h
⑤、培養(yǎng)完畢后，取出進行計數(shù)，因為是稀釋了1億倍，所以一個透明圈菌落代表1億/克，如果有200個透明圈，則是200億/克；注：對于我公司300億/克的乳酸糞腸球菌產(chǎn)品，需要稀釋2億倍才行。