溫度、光線、干燥、超聲波、過濾等因素均可影響細(xì)菌的新陳代謝及其化學(xué)組成，故常選用一些物理方法達(dá)到消毒和滅菌的目的。
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各種細(xì)菌都需在最適生長溫度的范圍內(nèi)生長。當(dāng)外界溫度明顯高于最適生長溫度，細(xì)菌被殺死；如果在低于細(xì)菌的最低生長溫度時，細(xì)菌代謝活動受抑制，則出現(xiàn)抑菌作用。
1.高溫：細(xì)菌蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞壁和細(xì)胞膜及酶類因熱力作用發(fā)生變性或凝固，活性消失，代謝發(fā)生障礙導(dǎo)致細(xì)菌死亡。大多數(shù)無芽胞細(xì)菌55℃～60℃加熱30～60min即被殺死；加熱100℃立即死亡，有芽胞的破傷風(fēng)芽胞梭菌需煮沸3h才被殺死。熱力滅菌分濕熱和干熱兩種。在同一溫度下，前者的效力大于后者。
?。?）濕熱：常用的方法有
1）巴氏消毒法：方法有兩種：一是61.1℃～62.8℃30min；另一是71.7℃l5～30s，目前主要用于牛乳消毒。
2）煮沸法：煮沸100℃（1個大氣壓狀態(tài)下）。5min中可殺死細(xì)菌繁殖體，如于水中加入2％碳酸鈉，則可提高其沸點(diǎn)至105℃，既殺死芽胞，又防止金屬器皿生銹。
3）流通蒸氣滅菌法：常用阿諾（Arnold）流通蒸氣滅菌器或蒸籠。利用一個大氣壓下100℃水蒸氣進(jìn)行消毒。經(jīng)10～30min細(xì)菌繁殖體被殺死，但對芽胞的作用不大。
4）間歇滅菌法：采用間歇加熱方式達(dá)到滅菌目的。方法是將待滅菌物品置于Arnold滅菌器內(nèi)，經(jīng)l00℃加熱15～30min，每日一次，連續(xù)3次。每次滅菌后，取出再置37℃孵箱過夜，使殘存的芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再通過流通蒸氣加熱使之被殺死。這樣可達(dá)到殺死芽胞又使不耐100℃的物質(zhì)保存下來。
5）加壓蒸汽滅菌法：利用密閉的耐高壓的高壓蒸汽滅菌器，在蒸汽不外溢的條件下，使鍋內(nèi)壓力增高，蒸汽的溫度也隨之增高，大大加強(qiáng)其殺菌效力。通常在103.4kPa的壓力下達(dá)121.3℃，維持15～20min可殺滅所有細(xì)菌芽胞和繁殖體。本法適用于耐高溫、耐濕物品的滅菌，如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等。
?。?）干熱
1）燒灼：是常用的干熱滅菌法。微生物實(shí)驗(yàn)室使用的接種環(huán)、接種針、瓶口和試管口常在火焰上燒灼滅菌。
2）干烤：在密閉干烤箱內(nèi)加溫至160℃～170℃維持2h是對一般玻璃器皿、注射器、瓷器的滅菌方法，適用于高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)的物品。
2.低溫：一般細(xì)菌耐低溫，在低溫條件下，細(xì)菌代謝活動降低不再繁殖，能較長時間維持生命，故常用于保存菌種。為避免解凍時對細(xì)菌的損傷，可在低溫狀態(tài)下真空抽干，去盡水分，此法稱冷凍真空干燥法，可保存細(xì)菌數(shù)年至數(shù)十年，是目前保存菌種的最好方法。
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