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培養(yǎng)基常用的成分有哪些?快來圍觀!
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2018-11-12 10:13:21

一、水
      制備培養(yǎng)基必須使用純凈的,無微量金屬,殺菌性和抑菌性化學(xué)物質(zhì)的蒸餾水。注意,以加氯的水進(jìn)行蒸餾所得的蒸餾水,即使在使用前通過離子交換樹脂,也偶含有顯著量的游離氯.所以應(yīng)進(jìn)行測(cè)試,如正聯(lián)甲苯胺試驗(yàn)顯色。測(cè)試后,以硫代硫酸鈉中和后或進(jìn)行重復(fù)蒸餾后才能使用。
二、瓊脂
      瓊脂俗稱洋菜,英文名agar ,為由海藻類(主要足石花菜)提取出來的一種膠體多糖,即半乳聚糖水解后,產(chǎn)生半乳糖及少量五烷糖和有機(jī)硫。其化學(xué)性質(zhì)系為一種不帶側(cè)鏈的半乳聚糖甙,含有90%右旋半乳糖和10%左旋半乳糖。在約每10個(gè)吡喃半乳糖單位有一個(gè)首位或次位的羥基被硫酸脂化。其陰離子脂組(-SO2 -OH )主要是與鈣結(jié)合,但也有少數(shù)是和鎂、鈉、或鉀結(jié)合。
其制造方法,一般是在每年7-9 月收集海中石花菜,洗滌并經(jīng)曬干后保存。于冬季冰凍開始時(shí),按1:30 比例將干藻放入水中煮沸,然后加入硫酸少許并煮沸5-6 小時(shí)。過濾后待冷,用“漏子”推成粗條,再經(jīng)日曬夜凍2-3 周后,即成條狀瓊脂。
除少數(shù)菌種外,絕大多數(shù)細(xì)菌都不能分解瓊脂,因而瓊脂在培養(yǎng)某中無營養(yǎng)價(jià)值,只是在液體培養(yǎng)基中凝結(jié)成半固體或固體培養(yǎng)基而已。
國外商售瓊脂一般比較純凈,國內(nèi)瓊脂則含有雜質(zhì)較多,故在使用前應(yīng)先用冷水浸泡洗滌后才能使用。
供細(xì)菌培養(yǎng)使用的品質(zhì)優(yōu)良的瓊脂應(yīng)具有下列特性:
( l )凝固點(diǎn)不超過2 ℃ ,通常范圍在34~38 ℃ 。
( 2 )1L 的1.5%瓊脂,在蒸汽浴中重新完全溶化,不超過45 分鐘。
( 3 )在98 ℃ 能完全溶解子水。
( 4 )在45 ℃ 仍保待足夠的液態(tài),以利于試驗(yàn)時(shí)的混合均勻。
( 5 )與水的結(jié)合水平至少在50%以上,以保證完全的溶解性。
(6)含水量不超過原重17%。
( 7 )燃燒殘余物不超過3 %。
(8)金屬最高允許含量,鉛0.0005%,鐵0.001%,鎂0.1%,鈣0.2%,鈉0.4%,并不得含有抗菌物質(zhì)。
( 9 )透明度:在蒸餾水中加熱溶解后,呈微乳白色透明凝塊。無混濁沉淀及微粒。
( 10 )凝膠強(qiáng)度:即在1.5%瓊脂平板1cm2 表面上于20秒鐘內(nèi)使其破壞的最小重量(g)。優(yōu)良瓊脂應(yīng)在300-400克。
在實(shí)際應(yīng)用中,一般均將瓊脂做成按0.5%的差距,遞增至3%的生理鹽水瓊脂平板,然后用接種環(huán)或接種針試行劃線涂布,以決定該批瓊脂實(shí)際使用的濃度。
三、蛋白胨和蛋白質(zhì)水解物
      蛋白質(zhì)分子在水解過程中生成一系列的產(chǎn)物。這些產(chǎn)物按其復(fù)雜程度而分的次序是;月示,胨,多肽,最后產(chǎn)物是氨基酸。有些氨基酸在早期的水解過程中就可裂解出來。
月示和胨并不是均性的化學(xué)實(shí)體,而是原始蛋白質(zhì)分子斷片的混合物。月示和胨在組成上及大小上各不相同,將其歸于一類僅權(quán)是因?yàn)槎急憩F(xiàn)有某些共同的特性之故。在各種斷片中,當(dāng)溶液被硫酸銨半飽和時(shí)沉淀而出的稱為初級(jí)月示,被硫酸銨全飽和時(shí)沉淀而出的稱為次級(jí)月示。而胨則不發(fā)生沉淀。月示仍表現(xiàn)有膠體性質(zhì),但已有逐漸減少的趨勢(shì)。待蛋白質(zhì)分子分解至胨的階段時(shí),膠體性質(zhì)已完全消失。因此,胨除去硫酸銨飽和時(shí)不發(fā)生沉淀外,還可以擴(kuò)散透過火棉膠薄膜,也不呈現(xiàn)蛋白質(zhì)某些特殊的沉淀反應(yīng)。
因?yàn)樵率竞碗硕际窃嫉鞍踪|(zhì)分子斷片的非均相混合物,因此不同的制備方法將使月示和胨在組成上及性質(zhì)上有所差異。這些差異決定于用作原始材料的蛋白質(zhì)的本質(zhì),水解方法以及用于分離各種產(chǎn)物的方法。因此,市售的各種蛋白胨在組成上是互有差別的,所以在使用時(shí)應(yīng)對(duì)各種蛋白胨和蛋白質(zhì)水解物的成分及其特點(diǎn)有所了解,依據(jù)使用的目的和要求加以選用。
      蛋白胨的主要用途是供給細(xì)菌需要的氮源。為制備各種培養(yǎng)基最常使用的成分之一。
蛋白胨之的特點(diǎn)為:(1)易溶于水;(2)不因受高熱而凝固(加熱至130℃ 也不凝固),且可被細(xì)菌直接利用以助生長;( 3 )系兩性電解質(zhì),故有緩沖作用。
水解動(dòng)物蛋白質(zhì)的酶類有動(dòng)物消化腺,如胃蛋白酶和胰蛋白酶等。植物蛋白質(zhì)最常用的為木瓜酶,此外還有分解酵母時(shí)用的自溶酶等。
胃蛋白酶分解蛋白質(zhì)的結(jié)果,能得到含有蛋白分子較大碎片的產(chǎn)物(月示和胨),具有顯著的雙縮脲反應(yīng),此外還有較少量的低級(jí)多肽類和游離氨基酸。在這種蛋白胨中生長素很少,故不宜單獨(dú)用作培養(yǎng)基,必須和肉浸液等混合使用。胰蛋白酶消化的蛋白制品的特點(diǎn)是其成分中有很多游離的氨基酸,特別是色氨酸,低級(jí)的多肽類,含蛋白胨和蛋白月示較少,所以其營養(yǎng)價(jià)值比胃蛋白酶所消化蛋白質(zhì)的粗制品要高得多,比肉浸液加蛋白胨也要好得多,因大多數(shù)細(xì)菌在生長時(shí)最易利用游離的氨基酸,其次才是蛋白胨。
近年來國外商售蛋白胨品種增加很多,各種牌號(hào)也日新月異。
1.胰化酪蛋白胨 Peptone from Casein,trypsin digested(E.Merek)
本品為胰朊酶消化酪朊所得的蛋白胨。為淡黃色細(xì)純?nèi)缟暗姆勰?。?05 ℃ 干燥失重不超過5%,含磷1-1.5%可凝固性蛋白,也不含有可發(fā)酵性的碳水化合物。由于其色氨酸含量高,故多用于靛基質(zhì)試驗(yàn)。
2 .胰化肉蛋白胨 Peptone from meat,trypsin digested( E . Merck )
本品為胰朊酶消化肉所得的蛋白胨。通常用量為1%。為淡黃-淡棕色粉末,具特殊臭味。105 ℃ 干燥失重不超過5%。硫酸化灰分不超過7%。氯化鈉含量不超過l%。肌酸酐不少于0.8%,磷不少于0.5-1.0%,總氮量不少于13-15%。不能檢出可凝固蛋白。
3 .胃化肉蛋白胨 Peptone from meat,Pespindigested( E · Merck )
本品為胃朊酶消化肉所得的蛋白胨。為黃至淡棕色粉末。105 ℃ 干燥失重和硫酸化灰分分別不超過5%和8%。氯化鈉含量少于0.5%,磷不多于1%,總氮量不超過13.5-14.5%。檢查不出可凝固蛋白。
4 ,胰化明膠蛋白胨Peptone from gelatin,pancreatically digested ( E. Merck )
本品為胰液消化明膠所得的蛋白胨。可用于細(xì)菌培養(yǎng)基和食品添加劑。因其胱氨酸和色氨酸含量低并且沒有可發(fā)酵的碳水化合物,故很適合制備不良營養(yǎng)性培養(yǎng)基之用。為白至黃色粉末。105 ℃ 干燥失重和硫酸化灰分均不超過75??偟坎簧儆?4.5%。無可凝固蛋白。
5 ,植物蛋白胨Peptone from Soybean Meal,Papain-digested ( E . Meack )
本品為木瓜酶消化脫脂大豆粉所得蛋白胨。由于其營養(yǎng)物質(zhì)豐富并含有高濃度碳水化合物和維生素,特別是硫胺素,此外,其巰基含量也高,故對(duì)某些營養(yǎng)要求嚴(yán)格的細(xì)菌如奈氏菌群和梭狀芽孢桿菌屬可用為優(yōu)良的培養(yǎng)基礎(chǔ)。并很適于真菌和酵母的培養(yǎng)和在酒廠中乳酸桿菌常規(guī)檢驗(yàn)。因其碳水化合物含量高,故不能用于細(xì)菌發(fā)酵試驗(yàn)。本品為淡黃粉末。105 ℃ 干燥失重不超過5%??偟?-10%。無可凝固性蛋白。
6 .酪朊胰水解物,無磺胺對(duì)抗物Casein Hydrolysate,pancreatic,free from sulfonamide antagonists( E. Merck )
本品系用能獲得高含量游離氨基酸的高度無破壞性酶分裂工藝從酪朊得到的水解物,因其無磺胺對(duì)抗物(PABA ) 故主要用于磺胺敏感試驗(yàn)培養(yǎng)基。本品為淡黃色細(xì)粒粉。105℃干燥失重不超過7%。硫酸化灰分不超過10%。氮含最至少12%。無易發(fā)酵的碳水化合物,易溶于水。常用量0.3%。
7 .酪朊酸水解物,無維生素Casein Hgdrolysat,acid-hydrolysed,Vitamin-Free ( E.Nerck )
本品為鹽酸消化酪朊所得的水解物。在加工中維生素和其它生民促進(jìn)物均被大量破壞,因此,特用于微生物學(xué)維生素檢驗(yàn)的培養(yǎng)基制備。通常用量約15g / L ,但用于Mueller-Hinton瓊脂則為17.5g 。本品為淡黃色粉狀、易溶于水。在105℃干燥失重要多5%,硫酸化灰分不超過5%,氯化鈉含量約25%,氮不低于7%。
8 .酪朊酸水解物 Casein Hgdrolysate(E.Meck )
本品也是鹽酸消化酪朊的水解物,但保留一定程度的維生素和促生長物質(zhì),故可較廣泛應(yīng)用。特別用于白喉?xiàng)U菌,破傷風(fēng)桿菌和鏈球菌的毒素和鏈菌酶生產(chǎn)的培養(yǎng)。
9.肝酶化水解物L(fēng)iver Hgdrolgsate,enzymaticr ( E 、Merckk )
本品為牛肝經(jīng)酶消化所得的水解物。主要用于毛滴蟲屬、布魯氏菌屬、支原體屬,厭氧菌和真菌的培養(yǎng)。培養(yǎng)毛滴蟲屬每升培養(yǎng)基加25g、厭氧菌則加5-10g。
 10.胨蛋白胨 Proteose Peptone ( E 、Merck )
本品為含有大量低分子量肽、游離氨基酸和促生長因子的混合蛋白胨。以優(yōu)良營養(yǎng)質(zhì)量為特征,適用于毒素生產(chǎn)的培養(yǎng)。因不含有對(duì)氨基苯甲酸,也適用于制備敏感試驗(yàn)培養(yǎng)基。對(duì)萘氏菌屬、葡萄球菌、嗜血桿菌屬、沙門氏菌屬、巴斯德氏菌屬和棒狀桿菌屬均能供給優(yōu)良的營養(yǎng)基礎(chǔ)。
11.胰化多價(jià)蛋白胨 Tryptose(E 、Merck )
本品為含有大量胰化蛋白的混合蛋白胨,適于培養(yǎng)對(duì)營養(yǎng)要求嚴(yán)格的細(xì)菌,如布魯氏菌屬、鏈球菌和血瓊脂的制備。
12.酸化酪蛋白胨 Acidcase Peptone (BBL),Biocase
本品為鹽酸消化酪朊的水解物。氮含量8%,但缺乏胱氨酸和色氨酸。氯化鈉含量37%,維生素被鹽酸水解大量破壞。適用于B12和其它維生素在藥品和食品中含量的檢測(cè)以及毒素生產(chǎn)。
13.胰化明膠蛋白胨 Gelysate Peptone(BBL)Biogelytone
本品為胰化明膠的水解物。胱氨酸和色氨酸含量低并缺乏碳水化合物。適用發(fā)酵試驗(yàn)。
14 .胰化乳蛋白胨 Lactolysate Peptone ( BBL ) Lactlysate
本品為胰化乳白蛋白的水解物。適用于乳酸桿菌培養(yǎng)。因其色氨酸含量高,利于細(xì)菌色素的產(chǎn)生和靛基質(zhì)試驗(yàn)。本品特別適用于組織培養(yǎng)。
15 .胰化心肌蛋白胨Myosate  Peptone ( BBL ) , Biomyotone
本品為胰化心肌的水解物,比肉浸液或肉蛋白胨可使細(xì)菌生長較多較早。
16 .多價(jià)蛋白胨 Polypeptone Peptone(BBL )
 本品為胰化酪蛋白胨和胃化組織蛋白胨(Trypticase and Thiotone)等量的混合蛋白胨。適用一般細(xì)菌培養(yǎng)、特別是腸桿菌科。
17.植物蛋白胨 Phytone Peptone (BBL ) ,Biosoyase
本品為木瓜酶消化大豆粉所得水解物,維生素含量高、特別是硫氨素,并含有大量植物組織的碳水化合物、為培養(yǎng)各種細(xì)菌的優(yōu)良蛋白胨、包括真菌和許多營養(yǎng)要求嚴(yán)格的細(xì)菌,例如梭狀芽孢桿菌屬和奈氏菌屬某些菌種。含有本品的培養(yǎng)基一般可使細(xì)菌生長較快較多,在血平板上溶血反應(yīng)較典型。因碳水化合物含境豐富、故不適用于發(fā)酵試驗(yàn)。
18.胃化動(dòng)物組織蛋白胨Thiotone Peptone(BBL) , Biothione
本品為胃朊酶消化動(dòng)物組織所得的蛋白胨。用于血瓊脂檢測(cè)溶血反應(yīng)結(jié)果良好,因其含硫量高,故最適用于硫化氫試驗(yàn)。
19 .胰化酪蛋白胨 Trypticase Peptone(BBL)Trypcase
本品為胰化酪朊所得的蛋白胨,質(zhì)量優(yōu)良,最適用于靛基質(zhì)試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn),因其色氨酸含量高而無可查出的碳水化合物。可廣泛用于真菌和需氧及厭氧菌,包括肺炎球菌,乳酸桿菌、棒狀桿菌和梭狀芽孢桿菌以及水和牛奶等的細(xì)菌檢驗(yàn)。還適用于硝酸鹽還原試驗(yàn)。2%用量有促進(jìn)細(xì)菌光滑型生長作用,可用于原生動(dòng)物的培養(yǎng)和抑菌或殺菌劑的檢測(cè)。還適用于滅菌試驗(yàn)和抗生素或其它抗菌物質(zhì)的測(cè)定。
20.多月示蛋白胨 Bacto-Protone(Difco)
本品為各種月示、胨和氨基酸不同配合的蛋白胨。含月示豐富、適用于細(xì)菌生理代謝的研究、用于錫克氏試驗(yàn)白喉毒素稀釋液具有顯著穩(wěn)定作用。
四、酵母浸膏
      為啤酒酵母的水提取物,經(jīng)濃縮而成。因含各種維生素和氨基酸量較高,能為細(xì)菌提供良好的上長條件,故亦為制備培養(yǎng)基常用的基礎(chǔ)成分之一。常用量為0.3-5%。
五、牛肉浸膏
       為牛肉浸液經(jīng)蒸發(fā)濃縮而成,其原含有的糖類等不耐熱物質(zhì),因受熱破壞,以至其營養(yǎng)價(jià)值不如肉浸液豐富。但因其不含有糖類,故多用于制備醣類發(fā)酵試驗(yàn)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)液。但應(yīng)注意,一般商售的牛肉浸膏,常加有較多的氯化鈉,有時(shí)可高達(dá)30%,甚至還加有防腐劑。此外.不同牌號(hào)的牛肉浸膏其成分也各有差異,故在使用前應(yīng)對(duì)其成分有所了解,并應(yīng)用已知菌種進(jìn)行予試。其用量一般為0.2-0.5%。若質(zhì)量較差、可提高至1.0%。
六、麥芽浸膏
      為發(fā)芽大麥粒的水提取物。因其含有高濃度的各種碳水化合物,特別是麥芽糖含量豐富,故為培養(yǎng)酵母菌和各種真菌的常用成分。
七、馬鈴薯浸膏
      含有豐富的碳水化合物和某些特殊的蛋白質(zhì)和維生素。常用于百日咳桿菌和真菌培養(yǎng)基。并對(duì)蛋白胨或瓊脂中所含阻害細(xì)菌發(fā)育的物質(zhì)具有緩和作用。
其制備法,將馬鈴薯去皮切成薄片,加約三倍水,放冷庫浸提4天。取出煮沸蒸發(fā)使成粘稠液即成。注意,必須用新收獲的馬鈴薯制備。陳舊儲(chǔ)藏的不能采用。若顏色過深,應(yīng)以活性炭脫色。
八、番茄汁和柑桔汁
     常用于嗜酸性細(xì)菌培養(yǎng)基,特別對(duì)乳酸菌有顯著地促進(jìn)發(fā)育作用。原料的新鮮程度對(duì)其應(yīng)用效果具有顯著影響,其制法即將水果去皮絞碎,壓榨取汁,過濾即成。
九、明膠
       明膠是從骨原膠(Collagen)用沸水水解而來的蛋白質(zhì), Collagen是結(jié)締組織的主要成分,是一種不能溶解的蛋白質(zhì),但煮沸可容易地轉(zhuǎn)化為可溶性。
明膠的化學(xué)結(jié)構(gòu)與Collagen相似,其脯氨酸(Proline)和甘氨酸(glycine)含量特高,總氮為15%,含硫<2%,二氧化硫0.01%,重金屬<0.001%,在105℃干燥損失不超過15%.無過氧化物或磺胺類抗菌物質(zhì)。
明膠主要供作鑒別細(xì)菌用,約在28℃ 凝固,明膠可被各種細(xì)菌的明膠酶水解,且在37℃ 時(shí)即液化,所以不能代替瓊脂。
十、肝粉
      為新鮮牛肝經(jīng)脫水干燥加以研碎而成。作為天然氧化還原系統(tǒng)和營養(yǎng)物質(zhì)常用于厭氧菌,布氏桿菌和痢疾阿米巴原蟲培養(yǎng)基。一克肝粉約等于五克鮮肝。常用量為5%。亦可將煮熟牛肝或豬肝切成碎塊使用。

( +一)乳酪

為從牛奶取得的一種無纖維素的等電點(diǎn)牛奶蛋白質(zhì)。其商售品為白至淡黃色細(xì)粒粉,含氮14%以上,脂肪不超過0.5%、灰分不超過1.5%,在105℃干燥損失不超過8.0%。主要用于需氧乳酪分解菌的檢驗(yàn)。
(十二)無機(jī)元素
       對(duì)細(xì)菌而言,最需耍的無機(jī)元素為鈉、鉀、鎂、鐵、硫、磷、氯等,其他奴錳、鈷、銅、鈣等也有一些特殊作用。磷酸鹽、碳酸鹽或醋酸鹽兼有緩沖作用。無機(jī)元素的主要功用:
( 1 )構(gòu)成菌體的成分;
( 2 )作為酶的組成部分或?yàn)槊阜磻?yīng)的促進(jìn)者;
( 3 )維持酸堿度的平衡,
( 4 )調(diào)節(jié)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的滲透壓,
( 5 )作為自養(yǎng)菌的能源。
磷:細(xì)菌體中磷的含量較多,磷在代謝活動(dòng)中占有重要的地位,磷酸鹽是重要的緩沖劑之一。此外磷酸鹽可促進(jìn)芽孢進(jìn)步的發(fā)育。
硫:硫氫基(-SH )是許多酶類的必要基,硫是某些自養(yǎng)菌的能源。
鐵:鐵是過氧化氫酶,過氧化物酶、細(xì)胞色素、細(xì)胞色素氧化酶的組成部分,缺鐵時(shí),這些酶類的合成受影響。鐵對(duì)毒素的產(chǎn)生也很重要。只有在一定濃度范圍內(nèi)才能有毒素產(chǎn)生。
鎂:鎂與核糖核酸結(jié)合成復(fù)合物,存在于革蘭氏陽性菌菌體的表層,與革蘭氏染色有關(guān)。細(xì)菌為了生存和生長,也需要鎂離子。鎂也是細(xì)菌葉綠素的組成原素。
錳:糖代謝中許多酶類的活性都需要錳。錳對(duì)羧化作用是必需的。
鈣:變形桿菌需要鈣以合成蛋白酶,自養(yǎng)菌中亞硝酸鹽菌的生長也需要鈣。
鉀:鉀離子與磷的傳遞作用有關(guān)。
氯化鈉:主要是調(diào)節(jié)滲透壓
十三、發(fā)酵性化合物
       主要為碳水化合物和醇類等發(fā)酵性化合物。發(fā)酵性化合物可作為能源和碳源,或利用發(fā)酵反應(yīng)以鑒定細(xì)菌,因細(xì)菌具有各種酶系統(tǒng),能分解糖類,產(chǎn)生酸類、氣體和其他產(chǎn)物。不同細(xì)菌對(duì)各種糖類的分解能力不同。
常用的各種糖類、醇類和糖苷類包括:
單糖類:戊糖—— 阿拉伯糖、木糖、鼠李糖。
已糖—— 葡萄糖、甘露糖、左旋糖和半乳糖。
雙糖類:蔗糖、麥芽糖、乳糖和蕈糖。
三糖類:棉子糖。
多糖類:淀粉、菊糖、糊精、動(dòng)物淀粉。
醇類有:
三元醇:丙三醇
四元醇:赤絲藻醇
五元醇:側(cè)金盞花醇
六元醇:甘露醇、衛(wèi)茅醇、山梨醇
苷類有:水楊苷、松柏苷和馬栗樹皮苷。
非糖物質(zhì)有肌醇。
培養(yǎng)基中糖類加入量為0.5-1%,貴重價(jià)昂的糖加入0.5%,普通的糖可加入1%。
各種糖類因高溫而呈不同程度的水解和變質(zhì),特別和共它鹽類混合一起時(shí)尤甚,因此,最好先將糖類配成10-20%濃溶液,經(jīng)高壓蒸汽或阿諾氏蒸汽滅菌,或用賽氏器濾過后再加入。常用糖類中以葡萄糖和甘露醇性質(zhì)較穩(wěn)定,乳糖、麥芽糖和蔗糖較易分解。
十四、血液和體液
       血濃、血清或腹水中含有蛋白質(zhì)和生長因素,一般營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌需要血液或血清才能生長。新鮮的血清中含有補(bǔ)體,有殺菌作用,宜加熱滅活后再使用。使用新鮮血液時(shí),常用無菌的脫纖維血液,于培養(yǎng)基滅菌并冷至45~50℃時(shí)再行加入。
十五、選擇性抑菌劑
      在一些培養(yǎng)基中,常需加入某種特殊抑制劑,以抑制某些細(xì)菌的生長,利于檢出菌的生長和鑒別。一般稱為選擇性抑菌劑。
常用的選擇性抑菌劑有膽鹽、薔薇酸、亞硫酸鉍、煌綠、孔雀綠、亞硒酸鈉、四硫磺酸鈉、疊氮化鈉、結(jié)晶紫等。膽鹽、薔薇酸、亞硫酸鉍和煌綠都有抑制革蘭氏陽性菌的作用,疊氮化鈉還可抑制變形桿菌的生長。
各種不同革蘭氏陰性菌對(duì)同一染料或藥品的敏感度也不相同,利用該特性,可以有目的地抑制不需要的細(xì)菌,使病原菌更易被分離出來。
煌綠和孔雀綠能抑制大腸桿菌、痢疾桿菌和傷寒桿菌的生長、而適于分離其它沙門氏菌屬,亞硒酸鈉能抑制大腸桿菌、可用于分禽傷寒桿菌和其它沙門氏菌屬。四硫磺酸鈉可抑制大腸桿菌,而傷寒桿菌和副傷寒桿菌仍可生長。
茲摘要介紹如下:
1.膽鹽
膽鹽是一種膽酸的鈉鹽,是膽酸的羧基和甘氨酸或?;撬岬陌被ㄟ^酰胺鍵結(jié)合而成。脫氧膽酸鈉是在3 和12 碳上帶有羥基的二羥基化合物,它比三羥酸,即膽酸或?;悄懰峄钚愿?,缺少羥基的膽酸沒有活牲。脫氧膽酸鈉在水溶液中呈弱堿性,為無色。
膽鹽可降低培養(yǎng)基與菌膜界面上的表面張力、并使胞膜紊亂、加速天然的自溶過程。因脫氧膽酸鈉或牛磺膽酸鈉溶解活力最大、故常用于膽汁溶解試驗(yàn)中。膽鹽遇酸生成沉淀、使菌落的色素不致外散、更有利于鑒別。
市售膽鹽是中性,脫水膽鹽效果與新鮮膽汁相同、可代替鮮膽汁,避免引起培養(yǎng)基混濁,且可滅菌、濃度易控制。常用培養(yǎng)基中濃度為1.5g/L 。
Downie氏等把膽酸分成兩類:( 1 )非結(jié)合酸,其不同類型只是它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同,( 2 )絡(luò)膽酸,它是脫氧膽酸的加成化合物,根據(jù)增加物的類型不同而有差異。
?;撬崾怯砂被?、半胱氨酸衍生而來,它與膽酸形成的結(jié)合物稱為?;悄懰?。膽酸與甘氨酸結(jié)合稱為甘膽酸。脫氧膽酸是二羥酸,膽酸和?;悄懰崾侨u酸,所有的膽汁酸都有一個(gè)共同的基本核,即環(huán)戊烷多烴菲。?;悄懰?、甘膽酸、脫氧膽酸等對(duì)革蘭氏陽性菌有強(qiáng)大的抑制作用,對(duì)革蘭氏陰性菌僅有輕度的抑制作用。脂肪酸也有抑菌作用。
膽汁的固形成分約占總量的13%,其中膽酸約為5-6%,粘蛋白4%,類脂2%,膽固醇0.04%,無機(jī)物0.8%,膽汁色素0.2%。
膽汁具有降低表面張力的作用,使細(xì)菌的細(xì)胞膜損壞,原生質(zhì)中一部分內(nèi)容漏出,或促使菌體的崩解,但腸系細(xì)菌因在腸道內(nèi)長期與膽汁接觸.由于適應(yīng)作用,所以對(duì)它有一定的抗力。牛膽汁透析物中、含有3.25μg /ml的色氨酸、可能有增菌作用。膽汁中的粘蛋白可作為細(xì)菌營養(yǎng)物、并對(duì)膽酸和脂肪酸的抑菌力起一定的中和作用。常用量為10-20g/L,1g干燥粉約等于10-12g鮮膽汁。
2 .滌波
為商品名稱、系石油副產(chǎn)品。其主要成分為十二烷基硫酸鈉。具有抑制革蘭氏陽性細(xì)菌發(fā)育的作用,與膽酸鹽作用相似。由于其對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌的作用比膽酸鹽弱,且價(jià)格較便宜、因而近年來多用于培養(yǎng)基中。應(yīng)注意,其不同批號(hào)產(chǎn)品所含成分常有差異,故在使用前應(yīng)先進(jìn)行予試。
3 .苯乙醇
對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌有抑制作用。常在瓊脂培養(yǎng)基中加入0.25%量,以制備革蘭氏陽性球菌類的選擇性培養(yǎng)基。
4.疊氮化鈉
能抑制革蘭氏陰性細(xì)菌的生長發(fā)育,特別對(duì)變形桿菌抑制效能顯著,對(duì)革蘭氏陽性細(xì)菌則無作用。常用于奈氏糞鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng),用量一般為0.05%;用于葡萄球菌則為0.02%。
5.碲酸鹽或亞碲酸鹽
亦為革蘭氏陽性細(xì)菌分離培養(yǎng)的一種選擇性抑菌劑,常常用于葡萄球菌(凝固酶陽性)和白喉?xiàng)U菌分離培養(yǎng)基。在革蘭氏陰性細(xì)菌中,由于弧菌對(duì)其抵抗力較強(qiáng),故也用于霍亂弧菌,副溶血性弧菌的分離培養(yǎng)基。
8 .水化氯醛
能抑制變形桿菌的蔓延生長而不影響其他革蘭氏陰性桿菌的生長,并且在含血培養(yǎng)基中不發(fā)生溶血作用,所以不影響細(xì)菌溶血性能的鑒定。
7.煌綠和孔雀綠
能抑制益蘭氏陽性菌、大腸桿菌、痢疾桿菌和傷寒桿菌的生長,故常用于分離其它沙門氏菌的培養(yǎng)基。應(yīng)注意,商售品各批的色素含量常有差異,故在使用前必須要用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行測(cè)試實(shí)際使用量,不可拘守配方規(guī)定。
8.亞硒酸鹽
能抑制大腸桿菌、可用于分離傷寒桿菌和其它沙門氏菌培養(yǎng)基。
9.四硫磺酸鹽
由硫代硫酸鈉和碘經(jīng)氧化生成的四硫碳酸鈉,有抑制大腸桿菌作用、而對(duì)包括傷寒桿菌在內(nèi)的沙門氏菌均無抑制作用。因沙門氏菌具有四硫磺酸酶能分解四硫磺酸鈉,而大腸桿菌等沒有這種酶所以生長被抑制。
四硫磺酸鹽對(duì)熱頗為敏感、極易分解為硫酸,亞琉酸和硫。故培養(yǎng)基加碘后不能加熱。
10.各種抗生素和抗菌藥物
近年來國外一些新的選擇性培養(yǎng)基,多采用抗生素為選擇性抑菌劑以提高培養(yǎng)基的選擇效能,常見的有青霉素G、鏈霉素、多粘菌素B、頭孢霉素、放線菌酮、萬古霉素、兩性霉素、卡那霉素、桿菌肽、新霉素,新生霉素,短桿菌素,粘桿菌素 ,制霉菌素 ,甲氧芐氨嘧啶、磺胺嘧啶等。
11.吐溫
為耐熱的水溶性長鏈脂肪酸的酯類,系山梨醇的聚氧乙烯衍生物,即:
吐溫20   聚氧乙烯月桂酸山梨醇脂
吐溫40   聚氧乙烯棕櫚酸山梨醇脂
吐溫60   聚氧乙烯硬脂酸山梨醇脂
吐溫80   聚氧乙烯油酸山梨醇脂

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