中國微生物菌種查詢網(wǎng) 細菌抗酸染色法（又稱耐酸染色法）是檢查抗酸細菌(如結(jié)核桿菌、麻風桿菌、分支桿菌等)的一種特殊染色法，屬于復染色法。細菌抗酸染色的方法很多，常用的是先以濃石炭酸復紅加溫初染，隨即以鹽酸酒精或硫酸水脫色，最后用美藍液復染。
一、抗酸染色液的配制
1、石炭酸品紅（復紅）染色液
堿性品紅：0.3g
95%乙醇：10mL
5%酚水溶液：90mL
將品紅溶解于乙醇中，然后與酚溶液混合。
2、3%鹽酸-乙醇
濃鹽酸：3mL
95%乙醇：97mL
3、呂氏堿性美藍染色液
美藍（亞甲基藍）：0.3g
95%乙醇：30mL
0.01%氫氧化鉀溶液：100mL
將美藍溶解于乙醇中，然后與氫氧化鉀溶液混合。
二、抗酸染色方法
（1）將涂片在火焰上加熱固定，滴加較多量的石炭酸品紅染色液，在玻片下以酒精燈火焰緩緩加熱至有蒸氣出現(xiàn)，維持微微發(fā)生蒸汽，但切不可使沸騰。染液如因蒸發(fā)減少時，應隨時添加。染5min，傾去染液，水洗。
（2）滴加3%鹽酸-乙醇脫色，直至無紅色脫落為止(所需時間視涂片厚薄而定，一般為1-3min)，充分水洗。
（3）滴加呂氏堿性美藍染色液，復染約30-60s，水洗。
（4）吸干或烘干，鏡檢。
三、抗酸染色結(jié)果
如屬于抗酸細菌，因菌體有抗御酸類脫色的特性，故能保持初染的紅色。其他細菌、細胞等物質(zhì)因無抗酸能力，初染的紅色被酸類所脫去，故被復染成藍色。
多數(shù)細菌可用單染法或革蘭氏染色法而著色，但有少數(shù)細菌，尤其是分枝桿菌屬（Mycobacterium）細菌剛需要用抗酸性染色法進行觀察。如分枝桿菌屬中的結(jié)核桿菌（Mycobacterium tuberculosis）和麻瘋桿菌（Mycobacterium leprae），用抗酸染色法極具診斷價值。
分枝桿菌與其它細菌不同，其細胞壁含有厚的脂質(zhì)，染料不易滲透。但一經(jīng)滲透，也不為酸性酒精脫色，故稱之為抗酸性。其它細菌剛易被酸性酒精所脫色，屬于非抗酸性。