冷凍干燥法中的預(yù)凍一般有三種方法：1.預(yù)凍最低溫度2.預(yù)凍時(shí)間3.預(yù)凍速率！下面中國(guó)微生物菌種查詢(xún)網(wǎng)就一一給大家介紹這三種預(yù)凍方法：
預(yù)凍最低溫度
預(yù)凍最低溫度一般應(yīng)低于溶液共晶點(diǎn)溫度，即在共晶點(diǎn)溫度以下8-10°C。共晶點(diǎn)與微生物類(lèi)群、保護(hù)劑的種類(lèi)和濃度有關(guān)。
預(yù)凍時(shí)間
適宜的預(yù)凍時(shí)間是指一次干燥之前所有的微生物樣品均已凍實(shí)所需要的時(shí)間，以免因抽真空而引起噴瓶。若預(yù)凍時(shí)微生物樣品凍結(jié)不實(shí)，凍干后微生物樣品表面凹凸不平。一般要求凍干瓶裝厚度不超過(guò)10 mm。微生物樣品的固體含量一般為2%-10%，如低于2%，凍干微生物樣品結(jié)構(gòu)的機(jī)械性能就可能不穩(wěn)定，而高于10%則凍干不易成功，且復(fù)水也比較困難。
預(yù)凍速率
預(yù)凍速率是影響微生物存活率的重要因素，由于微生物細(xì)胞對(duì)水分的滲透率不同，導(dǎo)致不同微生物最佳預(yù)凍速率不同?？焖賰鼋Y(jié)，胞內(nèi)的水分來(lái)不及通過(guò)細(xì)胞膜滲出，胞內(nèi)溶液過(guò)冷而結(jié)冰，細(xì)胞的體積膨大，最后導(dǎo)致細(xì)胞破裂；慢速凍結(jié)，胞外溶液中水分大量結(jié)冰，溶液的濃度提高，胞內(nèi)的水分便大量向外滲透，導(dǎo)致細(xì)胞的劇烈收縮，造成細(xì)胞損傷。實(shí)驗(yàn)證明，快速凍結(jié)導(dǎo)致升華速率低，解吸速率快，慢速凍結(jié)反之。實(shí)際上一般凍干微生物樣品的預(yù)凍速率介于快凍與慢凍之間。就細(xì)菌而言，通常采用分段降溫速率，從室溫快速降到約4°C，然后每分鐘降低1°C，至-40°C后，最后按每分鐘3-5°C的速率降至-70°C左右。