中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng)大腸菌群主要包括暢桿菌科中韻埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、魔雷伯氏菌屬和腸桿菌屬。這些屬的細(xì)菌均來自于人和溫血?jiǎng)游锏哪c道,需氧與兼性厭氧,不形成芽孢;在35~37℃條件下,48 小時(shí)內(nèi)能發(fā)酵乳糖聲酸產(chǎn)氣,革蘭氏陰性。大腸菌群中以埃希氏菌屬為主,埃希氏菌屬教俗稱為典型大腸桿菌。大腸菌群都是直接或間接地來自人和溫血?jiǎng)游锏募S便。本群中典型大腸桿菌以外的菌屬,除直接來自糞便外,也可能來自典型大腸桿菌排出體外7~30 天后在環(huán)境中的變異。所以食品中檢出大腸菌群J表示食品受動(dòng)人寢溫血?jiǎng)游锏募S便污染,其中典型大腸桿菌為糞便近期污染,其他菌屬則可能為糞便的陳舊污染。

大腸菌群分布較廣,在恒溫動(dòng)物糞便和自然界廣泛存在。調(diào)查研究表明,大腸菌群細(xì)菌多存在于恒溫動(dòng)物糞便、人類經(jīng)?;顒?dòng)的場(chǎng)所以及有糞便污染的地方,人、畜糞便對(duì)外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。糞便中多以典型大腸桿菌為主,而外界環(huán)境中則以大腸菌群其他型別較多。
由于大腸菌群指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌,即:需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。因此大腸菌群的檢測(cè)一般都是按照它的定義進(jìn)行。國(guó)內(nèi)采用的進(jìn)出口食品大腸菌群檢測(cè)方法主要有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和原國(guó)家商檢局制訂的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)方法在檢測(cè)程序上略有不同。
1、原國(guó)家商檢局制訂的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),等效采用美國(guó)FDA的標(biāo)準(zhǔn)方法,用于對(duì)出口食品中的大腸桿菌進(jìn)行檢測(cè)。 檢驗(yàn)采用兩步法:
推測(cè)試驗(yàn):樣品稀釋后,選擇三個(gè)稀釋度,每個(gè)稀釋度接種三管LST肉湯。36±1℃培養(yǎng)48±2h,觀察是否產(chǎn)氣。
證實(shí)試驗(yàn):將產(chǎn)氣管培養(yǎng)物接種煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯管中,36±1℃培養(yǎng)48±2h,觀察是否產(chǎn)氣。以BGLB產(chǎn)氣為陽性。查MPN表,報(bào)告每ml(g)樣品中大腸菌群的MPN值。
具體操作參見SN0169-92 《中華人民共和國(guó)進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗(yàn)方法》
2、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn):國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)采用三步法,即:乳糖發(fā)酵試驗(yàn)、分離培養(yǎng)和證實(shí)試驗(yàn)。
乳糖發(fā)酵試驗(yàn):樣品稀釋后,選擇三個(gè)稀釋度,每個(gè)稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h,觀察是否產(chǎn)氣。
分離培養(yǎng):將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上,36±1℃培養(yǎng)18-24h,觀察菌落形態(tài)。
證實(shí)試驗(yàn):挑取平板上的可疑菌落,進(jìn)行革蘭氏染色觀察。同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h,觀察產(chǎn)氣情況。
報(bào)告:根據(jù)證實(shí)為大腸桿菌陽性的管數(shù),查MPN表,報(bào)告每1ml(g)大腸菌群的MPN值。具體操作參見
GB4789.3-2010《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群測(cè)定》
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