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中國微生物菌種查詢網(wǎng)教您怎樣培養(yǎng)厭氧菌
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2018-09-04 13:47:37

        厭氧菌培養(yǎng)是指在無氧的環(huán)境里培養(yǎng)出的細(xì)菌。 是人體內(nèi)主要的正常菌群。常用的厭氧培養(yǎng)方法主要有二大類,一是物理厭氧培養(yǎng)法 二是化學(xué)厭氧培養(yǎng)法 ,他們分別通過化學(xué)和物理的方法來制造厭氧環(huán)境,從而有利于厭氧菌的生長繁殖。
一、物理厭氧培養(yǎng)方法  
1、厭氧箱培養(yǎng)法
  為專門培養(yǎng)厭氧菌的培養(yǎng)箱,現(xiàn)多為全自動控制,當(dāng)將培養(yǎng)物放入培養(yǎng)箱,關(guān)上封閉門后,其自動啟動,通過多次抽掉空氣,灌入氮氣、二氧化碳及氫氣,最后形成厭氧環(huán)境。培養(yǎng)48 小時后即可取出培養(yǎng)物,觀察結(jié)果
2、厭氧缸培養(yǎng)法
  厭氧缸是一個可密封的玻璃缸,頂端有一個抽氣口,使用方法如下:A.將接種厭氧菌的平板立即放入?yún)捬醺住.在厭氧缸內(nèi)放入冷催化劑鈀粒和美蘭指示劑安瓿。C.用真空泵抽去缸中的空氣,使缸內(nèi)大氣壓降到10%毫米汞柱,然后充入氮氣,反復(fù)三次。最后充入80%氮氣,10%二氧化碳及10%氫氣。D.密閉厭氧缸。此時,缸內(nèi)99%的氧氣已被氮氣,二氧化碳及氫氣置換,殘余的氧氣,在鈀粒催化下與氫氣作用生成水,缸壁會有水滴出現(xiàn)。缸內(nèi)美蘭指示劑由淺蘭色轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色,表示缸內(nèi)氧氣已被驅(qū)除。E.放入37℃,培養(yǎng)48 小時后觀察結(jié)果。
二、化學(xué)厭氧培養(yǎng)法
  常用為厭氧生物袋培養(yǎng)法:厭氧生物袋是一種特制不透氣的塑料袋,袋中裝有氣體發(fā)生管、催化劑小管(內(nèi)放鈀粒)和氧化還原指示劑小管(美藍(lán)).接種好的平板放入袋中,排出袋中氣體,卷疊好袋口,用彈簧夾莢緊,然后折斷氣體發(fā)生小管中安瓿,使發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生CO2、H2 等,在催化劑鈀的作用下,H2+O2(袋中剩余氧) H2O,這更保證了無氧環(huán)境,經(jīng)0.5h 再折斷指示劑管中美藍(lán)液安瓿(美藍(lán)在無氧環(huán)境中呈無色美白,在有氧環(huán)境中又可變成藍(lán)色的美藍(lán)),如指示劑不變藍(lán),表示袋內(nèi)已成無氧環(huán)境,此時即可放37℃孵育培養(yǎng)。厭氧產(chǎn)氣管成份;碳酸氫鈉、磞氫化鉀、5%檸檬酸溶液。厭氧指示管成份:0.002%美藍(lán)、10%堿性葡萄糖。催化反應(yīng)管成份:鈀(A 型)。
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