中國微生物菌種查詢網(wǎng)結(jié)核分枝桿菌為細長略帶彎曲的桿菌,大小1~4X0.4μm。牛分枝桿菌則比較粗短。分枝桿菌屬的細菌細胞壁脂質(zhì)含量較高,約占干重的60%,特別是有大量分枝菌酸(mycolic acid)包圍在肽聚糖層的外面,可影響染料的穿入。分枝桿菌一般用齊尼(Ziehl- Neelsen)抗酸染色法,以5% 石炭酸復紅加溫染色后可以染上,但用3%鹽酸乙醇不易脫色。若再加用美藍復染,則分枝桿菌呈紅色,而其他細菌和背景中的物質(zhì)為藍色。本菌無芽孢、無鞭毛。是家畜、野生動物、禽類及人類結(jié)核病的病原菌.
1.形態(tài)與染色特性
在動物病灶內(nèi)的結(jié)核桿菌菌體正直或微彎曲,長1.5~4.0um,寬0.2~0.5um.有時菌體末端具有不同的分枝,有的兩端鈍圓,無鞭毛,無莢膜和無芽孢,沒有運動性。單在,成雙.間或成叢排列.在人工培養(yǎng)基上,由于菌型.菌株和環(huán)境條件不同.可出現(xiàn)多種形態(tài).如近似球形.棒狀或絲狀.在電鏡下觀察本菌具有復雜結(jié)構(gòu):由微莢膜:細胞外殼的三層結(jié)構(gòu)、胞漿膜、胞漿.間體,核糖體及中間核質(zhì)構(gòu)成。 本菌為革蘭氏陽性菌。一般苯胺染料難以著色。若用加熱或媒染劑處理使之染色后,可以抵抗鹽酸.酒精的脫色作用。萋-尼二氏對結(jié)核桿菌的抗酸染色法.就是根據(jù)這個道理進行的,因為結(jié)核桿菌中含有脂類,染料一旦進入細胞內(nèi)部很難脫出。用上述方法染色,結(jié)核桿菌被染成紅色,而其他非杭酸性菌和細胞雜質(zhì)均呈藍色。
2.培養(yǎng)特性
本菌為嚴格需氧菌;最適生PH6.5—6.8,最適生長溫度為37~37.5℃。本菌生長速度很慢,尢其是初代分離.在人工培養(yǎng)基上最快分裂速度為18h一代,一般1~2周才看見開始生長.3~4周才能旺盛的發(fā)育。
結(jié)核桿菌對營養(yǎng)要求極高,必須在含有血清.雞蛋。甘油.馬鈴薯及某些無機鹽的特殊培養(yǎng)基上.才能良好地生長。初代分離培養(yǎng),更是如此。在固體培養(yǎng)基上.菌落呈灰黃白色.干燥顆粒狀.顯著隆起.表面粗糙皺縮.菜花狀的菌落。在液體培養(yǎng)基內(nèi),于液面形成粗紋皺膜,培養(yǎng)基保持透明。若加入吐溫80于培養(yǎng)基中.可使結(jié)核桿菌呈分散均勻生長。
3.生化特性
結(jié)核分枝桿菌不發(fā)酵糖類。與牛分枝桿菌的區(qū)別在于結(jié)核分枝桿菌可合成煙酸和還原硝酸鹽,而牛分枝桿菌不能。熱觸酶試驗對區(qū)別結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌有重要意義。結(jié)核分枝桿菌大多數(shù)觸酶試驗陽性,而熱觸酶試驗陰性; 非結(jié)核分枝桿菌則大多數(shù)兩種試驗均陽性。熱觸酶試驗檢查方法是將濃的細菌懸液置68℃水浴加溫20分鐘,然后再加H2O2。觀察是否產(chǎn)生氣泡,有氣泡者為陽性。