CHL-Don ，中國倉鼠肺細(xì)胞
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2016-02-19 09:49:51
細(xì)胞庫編號(hào)：KCB82010YJ
細(xì)胞株名稱：CHL-Don ，中國倉鼠肺細(xì)胞
種屬：中國倉鼠
性別：雌性
組織來源：肺
生長特性：貼壁生長
形態(tài)特征：成纖維細(xì)胞
微生物，支原體檢測(cè)：陰性（-）
染色體：該細(xì)胞的染色體數(shù)目在22-27之間。
培養(yǎng)條件：
完全培養(yǎng)基： DMEM（內(nèi)含2mM L-glutamine）+10%胎牛血清(FBS).
培養(yǎng)條件：37℃ , CO2: 5%
傳代方法：
收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。
（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加完全培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。
注：1、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。
2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。
凍存方法：
凍存液：90%完全培養(yǎng)液，10%DMSO.現(xiàn)用現(xiàn)配
儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存
上一篇：酵母菌形態(tài)及其結(jié)構(gòu)、繁殖
下一篇： 幽門螺桿菌特征及其培養(yǎng)