副溶血性弧菌的培養(yǎng)特性與操作要點(diǎn)及應(yīng)用與質(zhì)控提示！
小楊 / 2026-01-05 09:49:33
副溶血性弧菌是革蘭氏陰性嗜鹽弧菌，兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，核心培養(yǎng)特性為嗜鹽（無(wú)鹽不生長(zhǎng)）、最適 37℃與 pH 7.4-8.0、在 TCBS 呈綠色菌落，以下是詳細(xì)要點(diǎn)。
一、核心生長(zhǎng)條件
參數(shù) 范圍 最適 備注
NaCl 濃度 0.5%–10% 3%–3.5%（30–35 g/L） 無(wú)鹽不生長(zhǎng)，>10% 抑制生長(zhǎng)
溫度 8℃–44℃ 37℃ 4℃不生長(zhǎng)，5℃–10℃可存活
pH 7.0–9.5 7.4–8.0 <5.0 不生長(zhǎng)，耐堿不耐酸
氧氣 需氧為主，兼性厭氧 有氧 厭氧下生長(zhǎng)緩慢，液體表面易形成菌膜
水分活度（aw） ≥0.948 – <0.948 不生長(zhǎng)
二、液體培養(yǎng)表現(xiàn)
含 3% NaCl 肉湯：37℃培養(yǎng) 18–24 h，多為均勻混濁，表面形成菌膜；R 型菌株可見(jiàn)沉淀；動(dòng)力強(qiáng)，單鞭毛，呈“魚(yú)群樣”運(yùn)動(dòng)。
硫代硫酸鹽 - 檸檬酸鹽 - 膽鹽 - 蔗糖（TCBS）增菌液：混濁生長(zhǎng)，表面菌膜明顯，非選擇性增菌常用。
三、固體培養(yǎng)基菌落特征
TCBS 瓊脂（選擇性 + 鑒別）：圓形、半透明、光滑濕潤(rùn)，直徑 2–3 mm，綠色（不發(fā)酵蔗糖），質(zhì)感似口香糖，為典型菌落形態(tài)。
3.5% NaCl 瓊脂：隆起、光滑濕潤(rùn)、不透明，邊緣可蔓延不整齊，無(wú)色素。
羊血瓊脂：2–3 mm 圓形、灰白色、濕潤(rùn)隆起，部分菌株呈 β 溶血或 α 溶血。
SS 瓊脂：多不生長(zhǎng)，少數(shù)為 1–2 mm 扁平無(wú)色半透明，不易挑起、呈粘絲狀。
氯化鈉蔗糖瓊脂：綠色菌落（不發(fā)酵蔗糖），用于與發(fā)酵蔗糖的弧菌區(qū)分。
四、培養(yǎng)操作要點(diǎn)
培養(yǎng)基需添加 3% NaCl，避免無(wú)鹽或高鹽（>10%）抑制。
增菌用 3% NaCl 堿性蛋白胨水（pH 8.0–8.5），37℃ 6–8 h 后轉(zhuǎn)種 TCBS。
分離平板 37℃ 18–24 h 觀察，TCBS 綠色菌落優(yōu)先純化鑒定。
厭氧培養(yǎng)需延長(zhǎng)至 48 h 以上，且生長(zhǎng)較弱，不推薦常規(guī)使用。
質(zhì)控提示：標(biāo)準(zhǔn)菌株（如
ATCC 17802）在 TCBS 應(yīng)呈綠色菌落，無(wú)鹽平板不生長(zhǎng)，氧化酶陽(yáng)性，以驗(yàn)證培養(yǎng)基與條件有效性。
五、應(yīng)用與質(zhì)控提示
食品檢測(cè)：優(yōu)先用 TCBS 篩選綠色菌落，結(jié)合生化（氧化酶 +、賴(lài)氨酸脫羧酶 +、不發(fā)酵蔗糖）與血清分型確認(rèn)。
臨床分離：注意血瓊脂溶血株與非溶血株的致病性差異。
實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控：每批培養(yǎng)基做陽(yáng)性（
ATCC 17802）與陰性（如
大腸桿菌）對(duì)照，確保選擇性與鑒別性有效。
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