金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)原理、現(xiàn)象及方法!
小楊 / 2025-12-31 10:15:49
一、實(shí)驗(yàn)原理
顯色培養(yǎng)基的核心原理是利用特定的酶底物,當(dāng)目標(biāo)菌存在時(shí),其產(chǎn)生的特定酶會(huì)分解底物,釋放出有色物質(zhì),從而使菌落呈現(xiàn)出獨(dú)特的顏色,與其他雜菌區(qū)分開(kāi)。
選擇性抑制:培養(yǎng)基中含有抑制劑,這些抑制劑可以抑制樣本中大部分非目標(biāo)菌的生長(zhǎng),為金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)提供競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。
顯色底物:培養(yǎng)基中加入了特定的酶底物,例如 4 - 甲基傘形酮 -β-D - 葡萄糖醛酸(MUG) 和 5 - 溴 - 4 - 氯 - 3 - 吲哚 -β-D - 半乳糖苷(X-Gal)。
MUG:
金黃色葡萄球菌能夠產(chǎn)生 β- 葡萄糖醛酸酶。這種酶可以分解 MUG,釋放出具有熒光性的 4 - 甲基傘形酮。在紫外光(UV)照射下,菌落會(huì)發(fā)出明亮的藍(lán)色熒光。
X-Gal:
金黃色葡萄球菌能夠產(chǎn)生 β- 半乳糖苷酶。這種酶可以分解 X-Gal,釋放出藍(lán)色的 5 - 溴 - 4 - 氯 - 3 - 吲哚。因此,菌落本身會(huì)呈現(xiàn)出藍(lán)色。
通過(guò)這兩種底物的組合,金黃色葡萄球菌在菌落形態(tài)上通常表現(xiàn)為 圓形、凸起、表面光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊、呈黃色或奶油色,并且在顯色反應(yīng)下呈現(xiàn)藍(lán)色或具有藍(lán)色熒光。
二、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象
菌落形態(tài):
顏色:通常為 黃色或奶油色。這是因?yàn)榻瘘S色葡萄球菌能產(chǎn)生黃色的色素(如金黃色葡萄球菌素)。
形狀:圓形,邊緣整齊。
隆起度:凸起或略微凸起。
表面:光滑、濕潤(rùn)。
透明度:不透明。
顯色反應(yīng):
X-Gal 底物顯色:菌落呈現(xiàn)出 藍(lán)色。這是由于 β- 半乳糖苷酶分解 X-Gal 產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。
MUG 底物顯色:在紫外光(UV)燈照射下,菌落會(huì)發(fā)出 明亮的藍(lán)色熒光。這是由于 β- 葡萄糖醛酸酶分解 MUG 產(chǎn)生熒光產(chǎn)物。
總結(jié)來(lái)說(shuō):在金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基上,
金黃色葡萄球菌的菌落通常是 黃色或奶油色、圓形、光滑、濕潤(rùn)的菌落,并且在普通光下呈藍(lán)色,在紫外光下發(fā)出藍(lán)色熒光。
三、與傳統(tǒng)方法的對(duì)比
特性 金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基 傳統(tǒng)培養(yǎng)基
選擇性 強(qiáng)(抑制大多數(shù)雜菌) 中等(抑制部分雜菌)
特異性 高(利用特異性酶) 中等(基于菌落形態(tài)和生化反應(yīng))
靈敏度 高 中等
操作時(shí)間 短(通常 24-48 小時(shí)) 長(zhǎng)(通常 48-72 小時(shí))
結(jié)果判斷 直觀(顏色/熒光) 相對(duì)復(fù)雜(形態(tài) + 生化試驗(yàn))
適用范圍 快速篩查 確證試驗(yàn)
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