腸道菌增菌液體培養(yǎng)基的原理和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及注意事項(xiàng)！
小楊 / 2025-06-04 08:56:30
腸道菌增菌液體培養(yǎng)基的原理和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象如下：
一、原理
1、選擇性抑制
抑制劑：添加膽鹽、亮綠、亞硒酸鹽等成分，抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分非目標(biāo)革蘭氏陰性菌（如變形桿菌）。
2、營(yíng)養(yǎng)富集
高營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)：含蛋白胨、酵母提取物等，提供氨基酸、維生素等必需養(yǎng)分。
緩沖系統(tǒng)：維持pH穩(wěn)定（通常7.0-7.4），適應(yīng)腸道菌生長(zhǎng)需求。
3、目標(biāo)菌特異性促進(jìn)
針對(duì)不同目標(biāo)菌優(yōu)化配方，例如：
TTB（四硫磺酸鹽煌綠增菌液）：硫代硫酸鈉+碘→四硫磺酸鹽，抑制雜菌并促進(jìn)沙門氏菌生長(zhǎng)。
SC（亞硒酸鹽胱氨酸增菌液）：亞硒酸鹽抑制非沙門氏菌，胱氨酸中和毒性，增強(qiáng)沙門氏菌增殖。
二、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象
1、渾濁度增加
陽(yáng)性結(jié)果：培養(yǎng)后培養(yǎng)基變渾濁（細(xì)菌大量繁殖）。
陰性結(jié)果：保持澄清（無(wú)菌或目標(biāo)菌未生長(zhǎng)）。
2、產(chǎn)氣現(xiàn)象
部分腸道菌（如大腸桿菌）發(fā)酵產(chǎn)氣，可在杜氏管中觀察到氣泡聚集。
3、顏色變化
褪色：含亮綠的培養(yǎng)基可能因細(xì)菌代謝褪色。
4、菌膜/沉淀形成
志賀氏菌：可能在液面形成薄菌膜。
沙門氏菌：均勻渾濁或伴顆粒沉淀。
5、特殊代謝表現(xiàn)
硫化氫產(chǎn)生：沙門氏菌在TTB中生成黑色沉淀（FeS）。
三、典型應(yīng)用示例
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四、結(jié)果解讀注意事項(xiàng)
渾濁≠目標(biāo)菌：需轉(zhuǎn)接選擇性平板進(jìn)一步分離鑒定。
無(wú)渾濁可能原因：樣本無(wú)菌、抑制劑過(guò)強(qiáng)、培養(yǎng)條件不當(dāng)。
需結(jié)合革蘭染色、生化試驗(yàn)或分子檢測(cè)確認(rèn)菌種。
通過(guò)選擇性抑制和營(yíng)養(yǎng)富集，增菌液顯著提高目標(biāo)菌濃度，為后續(xù)分離鑒定奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象需結(jié)合具體培養(yǎng)基配方和目標(biāo)菌特性綜合分析。
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