芽孢桿菌的保存方法與注意事項及方法選擇建議！
小楊 / 2025-04-21 08:39:14
芽孢桿菌的保存方法因其形成芽孢的特性而具有更強的耐受性，以下為詳細保存方案及注意事項：
一、保存方法
1、斜面低溫保存法
步驟：將菌種接種于固體斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)至形成芽孢（約24-48小時），4℃保存。
周期：每3-6個月轉(zhuǎn)接一次，芽孢可延長保存時間至6個月以上。
適用場景：實驗室短期保存，操作簡便。
2、甘油管冷凍保存法
步驟：將菌液（含芽孢）與20%-30%滅菌甘油混合，分裝至凍存管，-80℃保存。
周期：可保存2-5年。
關鍵點：建議誘導芽孢形成后保存，提升存活率。
3、沙土管保存法
步驟：
滅菌沙土（河沙:泥土=3:1）與芽孢懸液混合。
真空干燥后密封，4℃或室溫避光保存。
周期：2-5年。
優(yōu)勢：適合無超低溫設備時長期保存。
4、冷凍干燥法（凍干）
步驟：芽孢懸液加保護劑（如脫脂牛奶），冷凍干燥后密封。
周期：10年以上，菌種庫首選方法。
設備需求：需凍干機，適合專業(yè)機構。
二、關鍵注意事項
無菌操作：全程滅菌處理，避免污染。
芽孢誘導：采用貧營養(yǎng)培養(yǎng)基或高溫（80℃處理10分鐘），促進芽孢形成。
生物安全：若為致病菌種，需在生物安全柜操作，遵循實驗室安全規(guī)程。
復蘇方法：凍存菌種需快速解凍（37℃水?。?，沙土管菌種需無菌接種至液體培養(yǎng)基活化。
三、方法選擇建議
短期使用：斜面保存，定期轉(zhuǎn)接。
中期研究：甘油管保存，兼顧便利與時長。
長期保藏：凍干或沙土管法，確保遺傳穩(wěn)定性。
通過合理選擇方法并嚴格操作，可有效維持
芽孢桿菌的活性和功能，滿足不同需求。
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