微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基的分類與應(yīng)用場景對比及注意事項(xiàng)!
小楊 / 2025-04-16 09:24:34
百歐博偉生物:微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中,保存培養(yǎng)基和增菌培養(yǎng)基是兩類關(guān)鍵工具,分別用于長期維持菌種活力和選擇性富集目標(biāo)微生物。以下是它們的分類、用途及特點(diǎn):
一、保存培養(yǎng)基
(一)目的:長期或短期保存微生物菌種,維持其活力和遺傳穩(wěn)定性。
(二)常見類型及方法:
1、斜面培養(yǎng)基
用途:短期保存(1-3個(gè)月)。
特點(diǎn):瓊脂斜面接種后冷藏(4°C),適合細(xì)菌和真菌(如營養(yǎng)瓊脂、PDA斜面)。
2、半固體穿刺培養(yǎng)基
特點(diǎn):穿刺接種后石蠟封口,減少氧氣接觸,延長保存時(shí)間。
3、甘油保存管
配方:菌懸液與15-30%滅菌甘油混合。
保存條件:-80°C超低溫或液氮長期保存(數(shù)年)。
4、冷凍干燥(凍干)保存
過程:菌液與保護(hù)劑(如脫脂奶)混合后凍干,密封避光保存。
特點(diǎn):存活期最長(10年以上),但設(shè)備成本高。
5、商用菌種保存管
示例:Microbank™(含多孔珠和保存液),-80°C保存。
(三)注意事項(xiàng):
定期復(fù)蘇驗(yàn)證菌種活性;
嚴(yán)格無菌操作避免污染;
二、增菌培養(yǎng)基
目的:選擇性促進(jìn)目標(biāo)微生物生長,抑制雜菌,用于樣本中低濃度病原體的富集。
1、細(xì)菌增菌培養(yǎng)基
通用液體培養(yǎng)基:
肉湯類:如普通肉湯(Nutrient Broth)、腦心浸液(BHI)用于廣譜增菌。
選擇性液體培養(yǎng)基:
SC增菌液:沙門氏菌(含膽鹽抑制革蘭氏陽性菌)。
TTB(硫代硫酸鹽-膽鹽-蔗糖肉湯):霍亂弧菌(高pH抑制雜菌)。
EB(堿性蛋白胨水):霍亂弧菌(堿性環(huán)境富集)。
李斯特菌增菌肉湯(LEB):含萘啶酮酸抑制革蘭氏陰性菌。
2、真菌/酵母增菌培養(yǎng)基
沙氏液體培養(yǎng)基(SDB):廣譜真菌增菌(低pH抑制細(xì)菌)。
麥芽浸膏肉湯:酵母或絲狀真菌富集。
3、其他特殊微生物
厭氧菌增菌:硫乙醇酸鹽肉湯(含巰基乙酸鈉降低氧化還原電位)。
分枝桿菌:Middlebrook 7H9肉湯(添加油酸-白蛋白-葡萄糖復(fù)合物)。
關(guān)鍵特點(diǎn):
選擇性抑制劑:膽鹽、抗生素(如萬古霉素)、染料(如結(jié)晶紫)。
營養(yǎng)強(qiáng)化:添加血液、血清或特定碳源(如甘露醇)。
三、應(yīng)用場景對比
四、注意事項(xiàng)
保存培養(yǎng)基需定期傳代,避免基因變異;
增菌培養(yǎng)基需結(jié)合目標(biāo)微生物特性優(yōu)化條件(如溫度、氣體環(huán)境);
臨床樣本增菌后需轉(zhuǎn)種至鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行鑒定。
根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的培養(yǎng)基類型,可顯著提高微生物分離和保存效率。
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