培養(yǎng)條件：原代細胞取組織現(xiàn)分
細胞簡介：
人腎足突細胞分離自腎組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi)，微血管受到高壓，而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細胞(podocyte)即腎小囊臟層上皮細胞，它附著于腎小球基底膜(GBM)的外側(cè)，連同GBM和毛細血管內(nèi)皮一起構(gòu)成了腎小球血液濾過屏障。足細胞特殊的解剖位置，使得其體內(nèi)研究較為困難；又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養(yǎng)的原代細胞不能增殖。足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，又稱足突(FP)，呈指狀交叉復蓋于GBM外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分，IV型膠原和纖維連接蛋白(FN)；在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)和組織蛋白酶，從而在GBM的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。足細胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30-40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜，即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統(tǒng)的最后屏障，對于維持腎小球濾過屏障結(jié)構(gòu)與功能完整性發(fā)揮關(guān)鍵作用。
5.方法簡介：
實驗室分離的人腎足突細胞采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩結(jié)合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測：
實驗室分離的人腎足突細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
人腎足突細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
