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名稱：小鼠胚胎干細(xì)胞 CE-3

種屬：小鼠

組織來(lái)源: 胚胎

生長(zhǎng)特征: 貼壁細(xì)胞

生長(zhǎng)形態(tài): 上皮維

培養(yǎng)體系:  90%DMEM(高糖）培養(yǎng)基+10%胎牛血清+1%雙抗

背景描述:  CE3 細(xì)胞系衍生自 D3 ES 細(xì)胞系

傳代比例:  1:2 1:3

培養(yǎng)條件: 溫度：37℃ 氣象：空氣 95%；CO2：5%

細(xì)胞凍存:  90%FBS+10%DSMO；推薦使用無(wú)血清凍存液

儲(chǔ)存 -80°；長(zhǎng)期保存液氮

倍增時(shí)間:  36hours 消化 3-5 分鐘

收到細(xì)胞后請(qǐng)第一時(shí)間觀察拍照并嚴(yán)格按照以下要求進(jìn)行操作（需遵照無(wú)菌操作要求）。

細(xì)胞接收處理：

1. 觀察包裝有無(wú)漏液、渾濁、破損等情況。有問(wèn)題請(qǐng)及時(shí)拍照反饋銷售人員。

2. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中 培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)淖詈棉k法，因經(jīng)過(guò)運(yùn) 輸貼壁細(xì)胞可能會(huì)有少許脫落；不用擰開培養(yǎng)瓶蓋.將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時(shí),穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 3-4 小時(shí)后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，觀察、拍照，觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是 否有污染情況 4. 貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò) 80%.可正常傳代;細(xì)胞密度若小于 80%,可 將 細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基吸出，預(yù)留 5ml-6ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),細(xì)胞密度超過(guò) 80% 可再次傳代操作。 懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至 50ml 無(wú)菌離心管 內(nèi)，1000rpm 離心 5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入 5ml 培養(yǎng)基吹打重懸。鏡下觀察時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò) 80%,可將細(xì)胞懸液分至 2 個(gè)細(xì) 胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至 5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò) 80%, 將細(xì)胞懸液移至 原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá) 80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。